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HEK-293sus-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
HEK-293sus-GFP-Puro稳转株
英文名称 | HEK-293sus-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1307 |
中文名称 | GFP 标记的 HEK-293sus 稳转株 |
Lot number | HEK-293sus-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
一、细胞特性
背景与来源
基础细胞系：HEK-293 细胞源于人胚肾细胞，具有贴壁生长特性，易培养、转染效率高，是常用的哺乳动物细胞表达系统之一。
“sus” 可能代表特定培养条件（如悬浮培养适应株）或细胞状态（如 “suspension” 悬浮型），使其适合大规模培养。
GFP（绿色荧光蛋白）：作为报告基因，用于可视化监测细胞转染效率、蛋白定位或细胞示踪。
Puro（嘌呤霉素）：标记基因，赋予细胞对嘌呤霉素的抗性，用于筛选稳定转染的细胞克隆。
关键特征
稳定表达：通过质粒转染或病毒感染（如慢病毒）将目标基因（如 GFP）整合到细胞基因组中，实现持续表达。
荧光标记：GFP 表达使细胞在荧光显微镜下发出绿色荧光，便于快速鉴定和分选阳性细胞（如流式细胞术）。
药物抗性：含 Puro 抗性基因，可通过嘌呤霉素筛选去除未成功转染的细胞，保留稳定克隆。
二、构建原理与流程
载体设计
使用含 GFP 基因和 Puro 抗性基因的载体（如质粒），通常带有真核生物启动子（如 CMV 启动子）驱动基因表达。
载体通过转染（如脂质体转染）或感染导入 HEK-293 细胞。
筛选与克隆化
转染后，加入嘌呤霉素进行筛选，未整合抗性基因的细胞死亡，存活细胞为成功转染的稳转株。
通过有限稀释法或单细胞分选（如流式细胞术）获得单克隆细胞，确保基因表达的均一性。
鉴定与验证
荧光检测：显微镜下观察 GFP 表达，确认细胞荧光强度和纯度。
分子生物学验证：通过 PCR、Western blot 检测 GFP 基因及蛋白的稳定表达。
三、应用场景
基因表达与蛋白生产
利用 HEK-293 细胞的高效表达能力，生产 GFP 融合蛋白，用于蛋白互作、定位研究或作为报告分子。
悬浮型细胞（若 “sus” 指悬浮培养）适合大规模悬浮培养，可通过生物反应器扩大生产（如重组蛋白、病毒载体）。
细胞示踪与成像
GFP 荧光可实时追踪细胞在体内外的迁移、分化或存活状态，适用于活体成像、细胞共培养实验等。
基因编辑与功能研究
作为基础细胞株，进一步进行基因编辑（如 CRISPR-Cas9），研究目标基因功能或疾病模型。
药物筛选与毒性测试
稳定表达特定受体或通路蛋白的细胞株可用于高通量药物筛选，GFP 信号可辅助评估细胞状态（如凋亡、增殖）。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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