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HEK-293sus-RFP-Puro稳转株

价格:¥ 电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/19 10:48:49

产品摘要:HEK-293sus-RFP-Puro稳转株是一种广泛应用于生物医学研究的人胚肾细胞系,具有易培养、转染效率高的特点。** 稳转株(稳定转染细胞株)** 是指通过基因工程手段将外源基因稳定整合到细胞基因组中,使其能够长期表达目标蛋白的细胞群体。

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旗舰版网址:http://www.xybio-sh.com

详细内容

HEK-293sus-RFP-Puro稳转株

英文名称

HEK-293sus-RFP-Puro polyclonal stable cell line

产品货号

XY-H1308

中文名称

RFP 标记的 HEK-293sus 稳转株

Lot number

HEK-293sus-10A2P

细胞规格

复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞

细胞形态

上皮细胞样

生长特性

贴壁生长

细胞株

构建流程

(1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒;

(2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞;

(3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株;

(4)稳转株质检(COA)。

完全培养基

DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加)

培养条件

(1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。

细胞冻存

无血清冻存液

存储条件

液氮

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HEK-293sus-RFP-Puro 稳转株概述

HEK-293 细胞是一种广泛应用于生物医学研究的人胚肾细胞系,具有易培养、转染效率高的特点。** 稳转株(稳定转染细胞株)** 是指通过基因工程手段将外源基因稳定整合到细胞基因组中,使其能够长期表达目标蛋白的细胞群体。

HEK-293sus-RFP-Puro 稳转株的关键特性:

名称解析

sus:可能代表特定培养条件(如悬浮培养,Suspension culture)或细胞特性(如易感型)。

RFP:红色荧光蛋白(Red Fluorescent Protein),作为报告基因,用于直观监测细胞状态或外源基因表达(如通过荧光显微镜观察)。

Puro:嘌呤霉素(Puromycin),用于筛选稳转株的抗性标记基因。含有 Puro 抗性基因的细胞可在嘌呤霉素存在的培养基中存活,未成功整合外源基因的细胞则被淘汰。

构建流程

载体设计:构建包含 RFP 基因、Puro 抗性基因及目标基因(若有)的重组质粒。

转染:通过脂质体转染、电穿孔等方法将质粒导入 HEK-293 细胞。

筛选:使用嘌呤霉素处理细胞,存活下来的细胞即为成功整合外源基因的稳转株。

单克隆化:通过有限稀释法或流式细胞术筛选单克隆细胞,确保基因表达的稳定性和均一性。

应用场景

基因表达研究:RFP 作为可视化标记,用于追踪细胞内蛋白定位、细胞迁移或细胞周期分析。

药物筛选:悬浮培养的特性(若 “sus” 指悬浮培养)适合高通量筛选,结合荧光激活细胞分选(FACS)技术分离特定细胞群体。

蛋白生产:稳定表达外源蛋白(如抗体、细胞因子),用于工业生产或科研制备。

病毒包装:HEK-293 细胞常用于生产慢病毒、腺病毒等载体,稳转株可提高病毒包装效率和稳定性。

培养与维护

培养基:通常使用 DMEM 或 MEM 培养基,添加 10% 胎牛血清(FBS),并维持嘌呤霉素(约 1-2 µg/mL)以维持抗性筛选压力(长期培养时需注意)。

培养条件:37℃、5%CO2 ,若为悬浮培养需保持温和搅拌(如 100-120 rpm)。

传代:贴壁细胞需胰酶消化后传代,悬浮细胞可直接离心换液,传代比例根据细胞密度调整(通常 1:3-1:5)。

仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。

以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


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