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HEK-293sus-RFP-Puro稳转株
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详细内容
HEK-293sus-RFP-Puro稳转株
英文名称 | HEK-293sus-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1308 |
中文名称 | RFP 标记的 HEK-293sus 稳转株 |
Lot number | HEK-293sus-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

HEK-293sus-RFP-Puro 稳转株概述
HEK-293 细胞是一种广泛应用于生物医学研究的人胚肾细胞系,具有易培养、转染效率高的特点。** 稳转株(稳定转染细胞株)** 是指通过基因工程手段将外源基因稳定整合到细胞基因组中,使其能够长期表达目标蛋白的细胞群体。
HEK-293sus-RFP-Puro 稳转株的关键特性:
名称解析
sus:可能代表特定培养条件(如悬浮培养,Suspension culture)或细胞特性(如易感型)。
RFP:红色荧光蛋白(Red Fluorescent Protein),作为报告基因,用于直观监测细胞状态或外源基因表达(如通过荧光显微镜观察)。
Puro:嘌呤霉素(Puromycin),用于筛选稳转株的抗性标记基因。含有 Puro 抗性基因的细胞可在嘌呤霉素存在的培养基中存活,未成功整合外源基因的细胞则被淘汰。
构建流程
载体设计:构建包含 RFP 基因、Puro 抗性基因及目标基因(若有)的重组质粒。
转染:通过脂质体转染、电穿孔等方法将质粒导入 HEK-293 细胞。
筛选:使用嘌呤霉素处理细胞,存活下来的细胞即为成功整合外源基因的稳转株。
单克隆化:通过有限稀释法或流式细胞术筛选单克隆细胞,确保基因表达的稳定性和均一性。
应用场景
基因表达研究:RFP 作为可视化标记,用于追踪细胞内蛋白定位、细胞迁移或细胞周期分析。
药物筛选:悬浮培养的特性(若 “sus” 指悬浮培养)适合高通量筛选,结合荧光激活细胞分选(FACS)技术分离特定细胞群体。
蛋白生产:稳定表达外源蛋白(如抗体、细胞因子),用于工业生产或科研制备。
病毒包装:HEK-293 细胞常用于生产慢病毒、腺病毒等载体,稳转株可提高病毒包装效率和稳定性。
培养与维护
培养基:通常使用 DMEM 或 MEM 培养基,添加 10% 胎牛血清(FBS),并维持嘌呤霉素(约 1-2 µg/mL)以维持抗性筛选压力(长期培养时需注意)。
培养条件:37℃、5%CO2 ,若为悬浮培养需保持温和搅拌(如 100-120 rpm)。
传代:贴壁细胞需胰酶消化后传代,悬浮细胞可直接离心换液,传代比例根据细胞密度调整(通常 1:3-1:5)。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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