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MGC-803-GFP-Puro稳转株
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详细内容
MGC-803-GFP-Puro稳转株
英文名称 | MGC-803-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1309 |
中文名称 | GFP 标记的 MGC-803 稳转株 |
Lot number | MGC-803-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

MGC-803-GFP-Puro 稳转株概述
MGC-803 细胞是一种人胃癌细胞系,源自人类胃癌组织,常用于胃癌的基础研究(如肿瘤细胞增殖、侵袭机制、药物敏感性等)。
**GFP(绿色荧光蛋白)** 是一种常用的报告基因,通过基因工程技术将 GFP 基因稳定整合到细胞基因组中,可使细胞表达 GFP,便于通过荧光显微镜观察细胞形态、定位或进行流式细胞术分选。
**Puro(嘌呤霉素)** 是一种抗生素,用于筛选成功整合外源基因的稳转细胞株。含有 Puro 抗性基因的细胞在嘌呤霉素存在的培养环境中可存活,未成功转染的细胞则被淘汰。
MGC-803-GFP-Puro 稳转株的构建流程
载体构建
构建含有 GFP 基因和 Puro 抗性基因的重组质粒(如慢病毒载体或质粒载体)。
载体中通常包含启动子(如 CMV)驱动 GFP 的表达,确保目的基因在细胞中稳定转录。
细胞转染 / 感染
通过脂质体转染、电穿孔或慢病毒感染等方法,将重组载体导入 MGC-803 细胞。
慢病毒感染适用于难转染的细胞类型,可实现外源基因的稳定整合。
嘌呤霉素筛选
转染 / 感染后的细胞在含有嘌呤霉素的培养基中培养,未成功整合抗性基因的细胞死亡,存活细胞即为稳定表达 GFP 的稳转株。
通常需持续筛选 2~4 周,直至获得单克隆稳转细胞群。
鉴定与扩增
荧光检测:通过荧光显微镜观察细胞是否表达 GFP,确认转染成功。
Western blot:检测 GFP 蛋白的表达水平,验证基因表达的稳定性。
单克隆化:通过有限稀释法或流式细胞分选获得单细胞来源的克隆,确保细胞株的均一性。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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