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LX-2-GFP-Puro稳转株
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详细内容
LX-2-GFP-Puro稳转株
英文名称 | LX-2-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1315 |
中文名称 | GFP 标记的 LX-2 稳转株 |
Lot number | LX-2-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 星状细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

LX-2-GFP-Puro 稳转株概述
LX-2 细胞是一种人肝星状细胞(Hepatic Stellate Cell, HSC)永生化细胞系,常用于肝纤维化、肝脏疾病等研究。
**GFP(绿色荧光蛋白)** 作为报告基因,可通过荧光显微镜直接观察细胞表达情况,用于示踪细胞、监测转染效率或研究基因定位。
**Puro(嘌呤霉素)** 是一种抗生素,用于稳转株筛选 —— 通过构建含嘌呤霉素抗性基因的载体,转染后用嘌呤霉素处理细胞,未成功整合目的基因的细胞会被杀死,存活细胞即为稳定表达目标基因的稳转株。
关键特性
特性 说明
细胞来源 人肝星状细胞,永生化(通常通过病毒转化等方式获得无限增殖能力)。
标记基因 稳定表达 GFP,荧光激发波长约 488 nm,发射波长约 509 nm,呈绿色荧光。
筛选标记 含嘌呤霉素抗性基因(如 puroR),可通过嘌呤霉素筛选维持稳转状态。
应用场景 - 肝纤维化机制研究
- 基因功能验证(如目的基因在 HSC 中的表达调控)
- 细胞示踪或细胞迁移实验
- 药物筛选或毒性分析
构建流程(简要)
载体构建:将 GFP 基因与目的基因(如需)、嘌呤霉素抗性基因插入载体(如慢病毒载体、质粒载体)。
细胞转染:通过病毒感染(慢病毒 / 逆转录病毒)或化学转染法将载体导入 LX-2 细胞。
筛选与扩增:用嘌呤霉素处理细胞,杀死未成功转染的细胞,存活细胞克隆化培养并扩大培养。
鉴定:通过荧光显微镜观察 GFP 表达、Western blot 检测目的基因表达,验证稳转株稳定性。
应用优势
可视化追踪:GFP 荧光信号便于实时观察细胞在体外或体内的分布、迁移及形态变化。
稳定表达:避免瞬时转染的表达时效性问题,适合长期研究(如细胞增殖、信号通路分析)。
筛选便捷:嘌呤霉素筛选可高效富集阳性细胞,保证细胞群均一性。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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