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HT-1080-GFP-Puro稳转株
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详细内容
HT-1080-GFP-Puro稳转株
产品名称 | HT-1080-GFP-Puro 稳转株 |
产品货号 | XY-H1317 |
中文名称 | GFP 标记的 HT-1080 稳转株 |
Lot number | HT-1080-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

构建原理:通常是将携带 GFP 基因和嘌呤霉素抗性基因的载体,通过慢病毒转染等方式导入 HT-1080 细胞中。载体中的 GFP 基因可使细胞稳定表达绿色荧光蛋白,便于通过荧光显微镜等手段进行观察和追踪;嘌呤霉素抗性基因则使细胞具有对嘌呤霉素的抗性,利用这一特性,在细胞培养过程中加入嘌呤霉素进行筛选,只有成功导入载体并稳定表达抗性基因的细胞才能存活,从而得到稳定转染的细胞株。
细胞特性:
形态与生长:HT-1080 细胞在高密度状态时会有上皮样梭形细胞和圆形细胞两种形态,一般为贴壁生长,呈上皮细胞样。该稳转株继承了 HT-1080 细胞的基本生长特性,在含 10% 胎牛血清(FBS)、1% 青链霉素(PS)的 MEM 培养基中,于 37℃、5% CO2 的培养条件下能够生长良好。
荧光表达:由于稳定表达 GFP,在荧光显微镜下可以观察到细胞发出绿色荧光。这一特性使得在细胞实验中,可以方便地对细胞进行定位、追踪以及观察细胞的迁移、分化等过程。例如,在研究细胞的体内外分布、细胞间相互作用等方面,GFP 荧光标记可以提供直观的可视化信息。
药物抗性:对嘌呤霉素具有抗性。在细胞培养过程中,加入嘌呤霉素可以筛选出稳定转染的细胞,去除未成功导入载体或丢失载体的细胞,从而维持细胞株的稳定性和纯度。
应用领域:
肿瘤研究:HT-1080 细胞系源自纤维肉瘤组织,具有高度侵袭性,常被用于研究肿瘤侵袭性和转移的机制。该稳转株可通过 GFP 荧光标记,更清晰地观察肿瘤细胞在体内外的侵袭和转移过程,为肿瘤研究提供了有力的工具。例如,在动物模型中,可以观察肿瘤细胞在体内的生长、转移情况,以及评估不同治疗手段对肿瘤细胞侵袭和转移的影响。
基因功能研究:作为一种稳定表达 GFP 的细胞株,可用于研究与 GFP 融合的目的基因的功能。通过观察 GFP 的表达情况,可以间接了解目的基因的表达、定位和动态变化。同时,利用其嘌呤霉素抗性,在进行基因编辑或转染其他基因时,可以方便地进行筛选和富集,有助于建立稳定表达目的基因的细胞模型,从而深入研究基因在细胞生理过程中的作用。
药物研发:可用于筛选抗癌药物,并评估药物对细胞活性、凋亡和转移潜力的影响。通过观察 GFP 荧光强度的变化、细胞形态的改变以及细胞的生长情况等,来判断药物对肿瘤细胞的作用效果,为抗癌药物的研发提供实验依据。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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