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NCI-H661-GFP-Puro稳转株
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详细内容
NCI-H661-GFP-Puro稳转株
英文名称 | NCI-H661-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1366 |
中文名称 | GFP 标记的 NCI-H661 稳转株 |
Lot number | NCI-H661-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

背景信息:NCI - H661 是人大细胞肺癌细胞株,源自一位 43 岁患有大细胞肺癌的男性白人的淋巴结。在此基础上构建的 NCI - H661 - GFP - Puro 稳转株,是通过慢病毒转导等方式,将含有绿色荧光蛋白(GFP)基因和嘌呤霉素抗性(Puro)基因的表达载体稳定整合到 NCI - H661 细胞的基因组中而获得的。
相关基因:
GFP 基因:在细胞中稳定表达绿色荧光蛋白,使细胞能够发出绿色荧光。这一特性可用于细胞的示踪、定位以及观察细胞的生长、迁移、分化等过程,在荧光显微镜下可以方便地对细胞进行观察和分析。
Puro 基因:赋予细胞对嘌呤霉素的抗性。在细胞培养过程中,加入嘌呤霉素可以筛选出成功转染并稳定表达目的基因的细胞,只有含有 Puro 基因的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而实现对稳转株细胞的筛选和维持。
构建过程:一般先构建包含 GFP 基因、Puro 基因以及相关调控元件(如启动子、增强子等)的重组载体,通常以慢病毒载体为常用。然后将重组载体导入 293T 细胞等进行慢病毒包装,产生具有感染能力的慢病毒颗粒。收集病毒液,用其感染 NCI - H661 细胞,使病毒携带的目的基因整合到细胞基因组中。通过嘌呤霉素筛选以及单克隆化等步骤,获得稳定表达 GFP 的 NCI - H661 - GFP - Puro 稳转株细胞系。
应用领域:
肿瘤研究:可用于研究肺癌细胞的生物学特性,如细胞增殖、侵袭、转移等过程。通过观察 GFP 的表达情况,了解肿瘤细胞在体内外的生长动态和分布情况,为肺癌的发病机制研究和治疗靶点的探索提供重要的实验依据。
药物研发:作为药物筛选的模型细胞,用于评估抗肿瘤药物对肺癌细胞的作用效果。通过观察药物处理后细胞的生长、凋亡以及 GFP 表达的变化,判断药物的疗效和作用机制,为开发新型抗肿瘤药物提供实验支持。
细胞生物学研究:利用 GFP 的荧光特性,研究细胞内的信号转导、蛋白质定位等细胞生物学过程,有助于深入了解细胞的生理功能和调控机制。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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