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HuH-6-GFP-Puro稳转株
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详细内容
HuH-6-GFP-Puro稳转株
英文名称 | HuH-6-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1374 |
中文名称 | GFP 标记的 HuH-6 稳转株 |
Lot number | HuH-6-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

背景:HuH-6 细胞为人肝母细胞。稳转株是指在某一细胞株中过表达或抑制某一特定基因的细胞系。HuH-6-GFP -Puro 稳转株就是在 HuH-6 细胞的基础上,通过一定的技术手段,使细胞能够稳定表达绿色荧光蛋白(GFP),并且含有嘌呤霉素(Puro)抗性基因。
构建原理:通常是将包含 GFP 基因和 Puro 抗性基因的表达框构建到重组载体上,然后借助慢病毒系统或转座子系统等将目的基因的表达框导入 HuH -6 细胞,并整合到细胞的染色体上。这样,当细胞分裂时,目的基因就会随着染色体的复制而传递给子代细胞,从而实现 GFP 的稳定表达。同时,Puro 抗性基因的存在使得在细胞培养过程中,可以使用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了目的基因的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活并继续生长,从而得到稳定表达 GFP 的 HuH -6 细胞株,即 HuH -6 - GFP - Puro 稳转株。
应用:
荧光示踪:由于细胞稳定表达 GFP,在荧光显微镜下可以发出绿色荧光,因此可以方便地对细胞进行标记和追踪。例如,在研究细胞的迁移、分化、体内分布等过程中,通过观察 GFP 的荧光信号,能够直观地了解 HuH -6 细胞的行为变化。
药物筛选和基因功能研究:利用 Puro 抗性进行药物筛选,能够快速筛选出稳定表达目的基因的细胞。同时,通过对稳转株进行各种实验处理,对比正常 HuH -6 细胞,可以研究 GFP 基因或其他相关基因对细胞生长、增殖、凋亡、代谢等生物学功能的影响,也可用于研究与肝母细胞相关的疾病机制、药物作用靶点等。
作为实验模型:为相关疾病的研究、药物研发等提供了一个稳定的细胞模型。例如,在开发针对肝母细胞瘤的治疗药物时,可以利用该稳转株来评估药物对肿瘤细胞的作用效果、毒性等。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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