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Calu-3-RFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
Calu-3-RFP-Puro稳转株
英文名称 | Calu-3-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1383 |
中文名称 | RFP 标记的 Calu-3 稳转株 |
Lot number | Calu-3-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
一、基本概念
1. 背景与组成
Calu-3 细胞：
人非小细胞肺癌细胞系，来源于肺腺癌，具有上皮细胞形态，常用于研究肺癌生物学、药物筛选、细胞极性和上皮屏障功能等。
RFP：
红色荧光蛋白（Red Fluorescent Protein），作为报告基因，用于标记细胞，便于通过荧光显微镜观察、分选或追踪细胞。
Puro：
嘌呤霉素（Puromycin），是一种抗生素，用于稳转株筛选。携带 Puro 抗性基因的细胞可在含嘌呤霉素的培养基中存活，未成功转染的细胞则被淘汰。
稳转株：
通过基因工程技术将外源基因（如 RFP 表达载体）稳定整合到细胞基因组中，使目的基因持续表达的细胞株。
二、构建流程
载体构建：
将 RFP 基因与 Puro 抗性基因构建到同一质粒载体中（如慢病毒载体、逆转录病毒载体等）。
细胞转染：
通过病毒感染（常用慢病毒）或化学转染方法将载体导入 Calu-3 细胞。
筛选与鉴定：
在培养基中添加嘌呤霉素，筛选出成功整合外源基因的细胞（未转染细胞死亡）。
通过荧光显微镜观察红色荧光表达，或通过流式细胞术（FACS）分选高表达 RFP 的单克隆细胞，获得纯合稳转株。
稳定性验证：
传代培养细胞，检测 RFP 表达的持续性和一致性，确保外源基因稳定遗传。
三、应用场景
细胞追踪与成像：
RFP 荧光可用于实时观察细胞在体内外的迁移、侵袭或与其他细胞的相互作用（如肿瘤细胞与免疫细胞）。
药物筛选与毒性分析：
通过荧光强度变化评估药物对细胞活性的影响（如细胞凋亡、增殖抑制）。
结合高通量筛选技术，快速筛选靶向肺癌的候选药物。
基因功能研究：
作为工具细胞株，用于研究特定基因（如与肺癌转移相关基因）的功能，或通过 RFP 标记联合其他分子生物学技术（如免疫荧光染色）分析蛋白定位与互作。
动物模型构建：
将稳转株接种到免疫缺陷小鼠体内，建立荧光标记的肺癌移植瘤模型，通过活体成像技术监测肿瘤生长和转移。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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