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KB-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
KB-GFP-Puro稳转株
英文名称 | KB-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1410 |
中文名称 | GFP 标记的 KB 稳转株 |
Lot number | KB-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
KB 细胞系：KB 细胞最初被认为源自口腔表皮癌，但后续研究发现其起源细胞已被 HeLa 细胞污染。它属于上皮细胞样，呈贴壁生长，培养时常用 90% MEM 培养基加 10% 胎牛血清，在气相为 95% 空气加 5% 二氧化碳、温度为 37℃的环境中生长良好。KB 细胞含有人乳头状瘤病毒 18（HPV - 18）序列，在肿瘤学和病毒学研究中较为常用。
构建过程：通常采用慢病毒介导的方法构建。先将包含 GFP 基因和嘌呤霉素抗性基因的外源 DNA 克隆到慢病毒载体中，生成重组慢病毒载体。然后将重组慢病毒载体与包装质粒共转染到宿主细胞中，产生具有感染能力的慢病毒颗粒。用这些慢病毒颗粒感染 KB 细胞，使病毒整合到 KB 细胞的基因组中。，通过嘌呤霉素筛选，获得稳定表达 GFP 的 KB - GFP - Puro 稳转株。
应用：
基因表达和细胞追踪研究：GFP 作为一种报告基因，在荧光显微镜下可发出绿色荧光，能直观地观察到细胞内基因的表达情况，便于对 KB 细胞的生长、增殖、分化以及在体内的迁移、定位等进行实时追踪和监测。例如，在研究肿瘤细胞的侵袭和转移机制时，可通过观察 GFP 的荧光来了解 KB 细胞在动物模型中的迁移路径和分布情况。
药物筛选和细胞模型建立：由于该稳转株具有嘌呤霉素抗性，可用于筛选能够在嘌呤霉素存在条件下稳定生长的细胞克隆。同时，也可作为研究药物对 KB 细胞作用机制的细胞模型，通过观察药物处理后细胞的形态、生长、凋亡等变化以及 GFP 的表达情况，来评估药物的疗效和作用靶点。例如，筛选针对 KB 细胞的抗肿瘤药物时，可将不同药物作用于 KB - GFP - Puro 稳转株，观察细胞的存活和 GFP 表达情况，以确定药物的有效性和最佳作用浓度。
基因功能研究：通过稳定表达 GFP 或其他目的基因，可研究该基因在 KB 细胞中的功能，如对细胞生长、凋亡、信号转导等过程的影响。还可与 RNA 干扰技术结合，沉默特定基因后观察 GFP 表达及细胞表型的变化，从而深入了解基因之间的相互作用和调控机制。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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