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上海信裕生物科技有限公司 主营产品:ELISA试剂盒价格,检测试剂盒,白介素试剂盒,试剂盒价格,重组蛋白,单克隆抗体,多克隆抗体

第11年

当前位置: 阿仪网 > 生物试剂/抗体/细胞 > 细胞生物学 > 细胞/细胞株 > 上海信裕生物科技有限公司 > 产品展示 > 细胞 > 人细胞株 > HEL-GFP-Puro稳转株

HEL-GFP-Puro稳转株

价格:¥ 电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/19 10:48:49

产品摘要:HEL-GFP-Puro稳转株人类红白血病细胞系,具有无限增殖能力,常用于血液系统疾病、细胞信号传导等研究。

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产品完善度: 访问次数:566

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旗舰版网址:http://www.xybio-sh.com

详细内容

HEL-GFP-Puro稳转株

英文名称

HEL-GFP-Puro polyclonal stable cell line

产品货号

XY-H1394

中文名称

GFP 标记的 HEL 稳转株

Lot number

HEL-10A1P

细胞规格

复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞

细胞形态

淋巴母细胞样

生长特性

悬浮生长

细胞株

构建流程

(1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒;

(2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞;

(3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株;

(4)稳转株质检(COA)。

完全培养基

RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加)

培养条件

(1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。

细胞冻存

无血清冻存液

存储条件

液氮

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一、基本定义

细胞背景:

HEL 细胞:来源于人类红白血病细胞系,具有无限增殖能力,常用于血液系统疾病、细胞信号传导等研究。

GFP:绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein),作为报告基因,表达后可发出绿色荧光,便于通过荧光显微镜或流式细胞术观察和追踪细胞。

Puro:嘌呤霉素(Puromycin),是一种抗生素,用于稳转株筛选。携带 Puro 抗性基因的细胞可在含嘌呤霉素的培养基中存活,未成功转染的细胞则被淘汰。

核心特征:

HEL 细胞稳定表达 GFP 蛋白,且含有 Puro 抗性基因,可通过嘌呤霉素筛选维持其稳定性。

二、构建原理与流程

载体构建

构建含有GFP 基因和Puro 抗性基因的重组质粒(如慢病毒载体、逆转录病毒载体等)。

载体需包含启动子(如 CMV 启动子)以驱动 GFP 基因的持续表达。

细胞转染

通过病毒感染(慢病毒 / 逆转录病毒)或化学转染(如脂质体转染)将重组质粒导入 HEL 细胞。

病毒感染效率较高,适用于难转染的细胞类型。

筛选与鉴定

嘌呤霉素筛选:转染后的细胞在含嘌呤霉素的培养基中培养,未整合质粒的细胞死亡,存活细胞即为稳定转染的单克隆或多克隆细胞株。

荧光检测:通过荧光显微镜或流式细胞术检测 GFP 表达水平,验证稳转株的成功构建。

Western blot:进一步从蛋白水平确认 GFP 的稳定表达。

三、应用场景

细胞成像与追踪

利用 GFP 荧光特性,实时观察细胞形态、迁移、分化等动态过程,或在活体动物模型中追踪肿瘤细胞(如荷瘤小鼠)。

药物筛选与毒性分析

通过稳转株评估药物对细胞增殖、凋亡的影响。例如,GFP 表达强度变化可能反映药物对基因表达的调控作用。

基因功能研究

作为工具细胞,用于研究目的基因(如与 GFP 共表达的融合蛋白)的亚细胞定位、相互作用蛋白等。

细胞分选与富集

结合流式细胞术(FACS),通过 GFP 荧光强度分选高表达细胞,获得均一性更好的稳转株亚群。

仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。

以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


热门标签:HEL-GFP-Puro稳转株,GFP,标记的,HEL,稳转株,HEL-GFP-Puro,polyclonal,stable,cell,line

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