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详细内容
Farage-GFP-Puro稳转株
英文名称 | Farage-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1418 |
中文名称 | GFP 标记的 Farage 稳转株 |
Lot number | Farage-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

背景信息:Farage 细胞系是 1990 年从一位弥漫性大细胞非霍奇金淋巴瘤(DLCL)患者的淋巴结活检中分离出来并进行培养的,来源于人类淋巴系统,疾病类型为弥漫大 B 细胞淋巴瘤生发中心 B 细胞型,细胞形态为淋巴母细胞,生长特性为悬浮生长。
构建原理:通常是将含有绿色荧光蛋白(GFP)基因和嘌呤霉素抗性(Puro)基因的外源 DNA 片段,通过慢病毒转染等方法导入 Farage 细胞中。外源 DNA 整合到 Farage 细胞的染色体上,随着细胞分裂稳定传递,使细胞能够稳定表达 GFP 蛋白,同时获得对嘌呤霉素的抗性。
筛选方法:利用 Puro 抗性基因进行筛选。在细胞培养过程中,向培养基中添加嘌呤霉素,只有成功导入并稳定表达 Puro 抗性基因的细胞,即 Farage - GFP - Puro 稳转株才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,而未成功转染的细胞则会被杀死。
应用领域:可用于观察细胞的生长、迁移、分化等过程,由于 GFP 在紫外或蓝光激发下能发出绿色荧光,便于通过荧光显微镜等设备对细胞进行实时追踪和观察;也可用于研究特定基因在 Farage 细胞中的功能,通过将目的基因与 GFP 基因融合表达,观察目的基因的表达和定位情况;还可用于药物研发和筛选,利用稳转株筛选对 Farage 细胞生长、增殖有影响的药物,或者研究药物对特定基因表达的调控作用。
在培养 Farage - GFP - Puro 稳转株时,需要使用适合 Farage 细胞的培养基,如 RPMI 1640 培养基,添加 10% 胎牛血清、2.1 mM 稳定谷氨酰胺、2.0 g/L 碳酸氢钠等,并按照悬浮细胞的培养方法进行传代和培养。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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