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KB-RFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
KB-RFP-Puro稳转株
英文名称 | KB-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1411 |
中文名称 | RFP 标记的 KB 稳转株 |
Lot number | KB-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
构建原理：通常是将包含 RFP 基因和嘌呤霉素抗性基因的外源 DNA 克隆到特定载体上，然后通过转染或病毒侵染等方法将载体导入 KB 细胞（可能是某种肿瘤细胞系，如口腔表皮样癌细胞系）中。外源 DNA 整合到 KB 细胞的染色体上，使细胞获得稳定表达 RFP 和对嘌呤霉素抗性的能力。利用嘌呤霉素进行筛选，只有成功整合了外源 DNA 的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活并稳定表达 RFP。
应用领域：在生物学研究中，RFP 可作为荧光标记，用于观察细胞的形态、迁移、分化等生物学行为，以及追踪细胞在体内外的分布和命运。例如，在肿瘤研究中，可将 KB - RFP - Puro 稳转株接种到动物模型中，通过荧光成像技术观察肿瘤细胞的生长、转移等过程。同时，由于其对嘌呤霉素有抗性，可用于研究药物抗性机制，以及在药物筛选实验中作为对照细胞株，评估其他药物对细胞生长、增殖的影响。
优势：与瞬时转染相比，稳转株能够长期稳定地表达目的蛋白，便于进行长期的实验观察和研究。而且通过抗性筛选得到的稳转株细胞群体较为均一，目的基因的表达水平相对稳定，减少了实验误差。
构建流程：一般先确定 KB 细胞的培养条件、增值速度等相关信息，通过预实验确定慢病毒在 KB 细胞中的感染复数（MOI）以及嘌呤霉素的筛选浓度。然后利用慢病毒感染 KB 细胞，感染后根据细胞状态进行换液，在适当时间加入嘌呤霉素进行筛选。每天观察细胞的状态、生长情况以及 RFP 的表达水平，直至显微镜下观察到荧光细胞比例达到较高水平，如 90% 以上，即获得 KB - RFP - Puro 稳转株。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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