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HepG2.2.15-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
HepG2.2.15-GFP-Puro稳转株
英文名称 | HepG2.2.15-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1400 |
中文名称 | GFP 标记的 HepG2.2.15 稳转株 |
Lot number | HepG2.2.15-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | MEM + 10% FBS + 480 µg/mL G418 + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
主要特性与应用
1. 生物学特性
来源：人肝癌细胞系 HepG2，经基因工程改造引入 HBV 基因组（如 1.3 倍体 HBV DNA）、GFP 报告基因及嘌呤霉素抗性基因。
功能：
持续表达 HBV 病毒蛋白（如 Core、Pol、Surface 抗原）。
分泌 HBV 病毒颗粒（Dane 颗粒）及相关抗原，可用于病毒组装、释放机制研究。
GFP 荧光信号强度反映细胞活性或外源基因表达水平。
2. 应用场景
HBV 研究：
病毒复制动力学分析（如 GFP 荧光强度与病毒载量的相关性）。
抗病毒药物筛选（通过检测药物处理后 HBV 抗原分泌或 GFP 表达变化）。
基因编辑工具验证：
作为载体系统（如 CRISPR-Cas9）的靶细胞，通过 GFP 筛选编辑效率。
细胞生物学研究：
细胞增殖、凋亡或迁移的实时荧光追踪（结合时间 - lapse 显微镜）。
培养与筛选要点
1. 培养基与培养条件
基础培养基：通常使用 DMEM（高糖）或 MEM 培养基，添加 10% 胎牛血清（FBS）、1% 双抗（青霉素 / 链霉素）。
维持筛选：
稳转株构建初期需用嘌呤霉素（Puro）筛选（浓度通常为 1-5 µg/mL，需预实验优化）。
长期培养时可维持低浓度 Puro（如 0.5 µg/mL）以防止目的基因丢失。
培养环境：37℃、5%CO2 ，贴壁培养，传代时注意避免细胞过度汇合（建议 80%-90% 汇合度传代）。
2. 荧光检测与质量控制
GFP 观察：定期通过荧光显微镜检查细胞荧光强度，评估稳转株稳定性。
HBV 抗原检测：
酶联免疫吸附试验（ELISA）检测培养上清中 HBsAg、HBeAg 水平。
实时定量 PCR（qPCR）检测细胞内 HBV DNA 拷贝数。
污染监测：定期进行支原体检测，避免细菌 / 真菌污染影响细胞状态。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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