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IMR-32-RFP-Puro稳转株
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详细内容
IMR-32-RFP-Puro稳转株
英文名称 | IMR-32-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1423 |
中文名称 | GFP 标记的 IMR-32 稳转株 |
Lot number | IMR-32-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 神经母细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

IMR - 32 细胞:IMR - 32 细胞是一种人神经母细胞瘤细胞系,于 1967 年从一位 13 个月大的男婴下腹部神经母细胞瘤中分离建株。该细胞具有神经母细胞样形态,贴壁生长,可用于研究 neuronal 分化、神经母细胞瘤发病机制以及神经发育过程的分子机制等。
RFP:即红色荧光蛋白(Red Fluorescent Protein),是一种能发出红色荧光的蛋白质,常被用作报告基因。在细胞生物学研究中,RFP 可以方便地通过荧光显微镜等设备进行观察,用于追踪细胞、监测基因表达或蛋白质定位等。
Puro:指嘌呤霉素抗性基因(Puromycin Resistance Gene)。嘌呤霉素是一种氨基糖苷类抗生素,能抑制蛋白质合成。带有 Puro 抗性基因的细胞,在含有嘌呤霉素的培养基中能够存活,而没有该抗性基因的细胞则会被杀死,因此 Puro 抗性基因常用于筛选稳定转染的细胞。
构建过程
通常以含有 RFP 基因和 Puro 抗性基因的慢病毒载体(如 LV10(pGLVU6/RFP/Puro))为骨架,将其与慢病毒包装辅助载体共转染 293T 细胞,收集病毒液纯化后感染 IMR - 32 细胞。然后用嘌呤霉素筛选,杀死未感染的细胞,再通过荧光显微镜挑取单克隆红色荧光细胞集落,扩大培养后即可获得 IMR - 32 - RFP - Puro 稳转株。
应用
细胞追踪与观察:由于表达 RFP,可在荧光显微镜下方便地对 IMR - 32 细胞进行追踪和观察,了解其在培养过程中的生长、迁移、分化等行为。例如,在研究神经母细胞瘤细胞的侵袭和转移机制时,可通过观察 RFP 标记的细胞在体外模型中的迁移情况来进行分析。
基因表达研究:作为稳定转染的细胞株,可用于研究特定基因在 IMR - 32 细胞中的稳定表达及其对细胞功能的影响。比如,将目的基因与 RFP 基因构建在同一载体上,通过观察 RFP 的表达情况来间接反映目的基因的表达水平,进而研究目的基因对神经母细胞瘤细胞增殖、凋亡、分化等生物学过程的调控作用。
药物筛选与评价:IMR - 32 细胞常用于药物筛选 assays 以评估潜在治疗神经母细胞瘤的药物的 efficacy 和细胞毒性。IMR - 32 - RFP - Puro 稳转株在此基础上,可结合 RFP 的荧光特性以及嘌呤霉素筛选压力,更地研究药物对特定基因表达细胞的作用效果,为开发治疗神经母细胞瘤的新药物提供实验依据。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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