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详细内容
EJ-RFP-Puro稳转株
英文名称 | EJ-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1428 |
中文名称 | RFP 标记的 EJ 稳转株 |
Lot number | EJ-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

构建原理:通常是将含有目的基因(这里可能是与 RFP 相关的基因)以及嘌呤霉素抗性基因(Puro)的外源 DNA,通过慢病毒感染或脂质体转染等方式导入到宿主细胞 EJ 中。外源 DNA 整合到宿主细胞的染色体上,使细胞能够稳定表达红色荧光蛋白(RFP),同时具备对嘌呤霉素的抗性,便于后续利用嘌呤霉素进行筛选,得到稳定转染的细胞株,即 EJ-RFP-Puro 稳转株。
特点和应用:
可用于荧光观察:由于稳定表达 RFP,在荧光显微镜下可以发出红色荧光,便于研究人员直观地观察细胞的形态、分布以及在体内外的迁移、增殖等情况。例如,在细胞生物学实验中,可以通过观察 RFP 的荧光信号来追踪 EJ 细胞在不同培养条件下的变化,或者在动物模型中研究细胞在组织中的定位和动态变化。
利于药物筛选:细胞具有嘌呤霉素抗性,在含有嘌呤霉素的培养基中培养时,只有成功转染并稳定表达抗性基因的 EJ 细胞(即 EJ - RFP - Puro 稳转株)才能存活,而未转染或未稳定整合外源 DNA 的细胞则会被杀死。这使得研究人员能够方便地筛选出稳定表达目的基因的细胞,用于后续的实验研究,如基因功能验证、药物研发等方面的实验。
用于长期研究:与瞬时转染相比,稳转株能够长期稳定地表达目的基因,避免了瞬时转染中基因表达时间短的问题,更适合进行长期的细胞生物学实验和药物筛选等研究,为深入探究基因功能和细胞生理机制提供了稳定的细胞模型。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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