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A375-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
A375-GFP-Puro稳转株
英文名称 | A375-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1444 |
中文名称 | GFP 标记的 A375 稳转株 |
Lot number | A375-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
A375-GFP-Puro 稳转株概述
A375 细胞是源自人类恶性黑色素瘤的永生化细胞系，具有增殖能力强、易培养等特点，常用于癌症研究、药物筛选等领域。
**GFP（绿色荧光蛋白）** 作为报告基因，通过基因工程手段整合到细胞基因组中，使细胞在荧光显微镜下发出绿色荧光，便于实时追踪细胞状态、观察基因表达或蛋白定位。
**Puro（嘌呤霉素）** 是一种抗生素，用于筛选成功转入目标基因的细胞。稳转株构建过程中，未整合目的基因的细胞会被嘌呤霉素杀死，存活细胞即为稳定表达 GFP 的稳转株。
关键特性
特性 说明
细胞来源 人恶性黑色素瘤，ATCC 等权威细胞库可查
标记基因 表达 GFP，激发波长 488 nm，发射波长 507 nm，荧光强度稳定，适用于流式细胞术、荧光成像等检测。
筛选标记 携带嘌呤霉素抗性基因（PuroR），可通过嘌呤霉素（通常浓度 1-5 µg/mL）维持稳转状态。
培养条件 - 培养基：DMEM（高糖）+10% 胎牛血清（FBS）+1% 双抗（青霉素 / 链霉素）
- 环境：37℃，5% CO₂，饱和湿度。
应用场景 - 细胞示踪（如体内成瘤实验）
- 基因表达分析
- 药物递送系统评价
- 细胞增殖与凋亡研究。
构建流程（简要）
载体构建：将 GFP 基因与嘌呤霉素抗性基因插入质粒载体（如 pLVX-GFP-Puro）。
病毒包装：利用慢病毒或逆转录病毒系统，将重组质粒转入包装细胞（如 293T 细胞），生产病毒颗粒。
细胞感染：病毒感染 A375 细胞，GFP 和 PuroR基因通过病毒整合到细胞基因组。
筛选与扩增：嘌呤霉素处理细胞（约 2 周），杀死未成功转染的细胞，存活克隆扩大培养后获得稳转株。
鉴定验证：通过荧光显微镜观察 GFP 表达、流式细胞术检测荧光强度均一性，确保稳转株稳定性。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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