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详细内容
NK-T-RFP-Puro稳转株
英文名称 | NK-T-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1446 |
中文名称 | RFP 标记的 NK-T 稳转株 |
Lot number | NK-T-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞背景:NK - T 细胞是一种兼具自然杀伤细胞(NK 细胞)和 T 细胞部分特征的淋巴细胞,在免疫系统中发挥着重要作用,如参与抗肿瘤、抗病毒感染以及免疫调节等过程。以 NK - T 细胞为基础构建稳转株,有助于深入研究 NK - T 细胞的生物学功能、相关信号通路以及在疾病发生发展中的作用等。
RFP 标记:RFP 即红色荧光蛋白(Red Fluorescent Protein)。在细胞实验中,常将 RFP 与目标蛋白融合表达,或使 RFP 单独在细胞内表达作为一种报告基因。利用 RFP 独特的荧光性质,通过荧光显微镜、流式细胞仪等设备,可以方便地对细胞进行观察、追踪和分选。例如,在研究细胞的迁移、分化、细胞间相互作用以及蛋白质的亚细胞定位等方面,RFP 标记可以直观地呈现相关细胞或蛋白的位置和动态变化。
Puro 筛选:Puro 是嘌呤霉素(Puromycin)的缩写。在构建稳转株时,通常会使用含有嘌呤霉素抗性基因的载体。将外源基因导入细胞后,利用嘌呤霉素对细胞进行筛选。只有那些成功导入并整合了含有嘌呤霉素抗性基因载体的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活并继续生长,而未成功转染的细胞则会被嘌呤霉素杀死,从而得到稳定表达外源基因的细胞株,即稳转株。
构建过程:一般是先将包含目的基因(如可能与 NK - T 细胞功能相关的基因)以及 RFP 基因和嘌呤霉素抗性基因的载体,通过慢病毒感染或脂质体转染等方法导入 NK - T 细胞。然后,使用嘌呤霉素进行筛选,在筛选过程中,不断去除未成功转染的细胞,最终获得能够稳定表达目的基因和 RFP 的 NK - T 细胞株,即 NK - T - RFP - Puro 稳转株。
应用领域:在免疫学研究中,可用于观察 NK - T 细胞在体内外的迁移、分布以及与其他免疫细胞的相互作用;在肿瘤研究中,可研究 NK - T 细胞对肿瘤细胞的杀伤机制、肿瘤微环境对 NK - T 细胞功能的影响等;还可用于药物研发,如筛选能够调节 NK - T 细胞功能的药物,以及研究药物对 NK - T 细胞的作用机制等。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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