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RWPE-1-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
RWPE-1-GFP-Puro稳转株
英文名称 | RWPE-1-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1464 |
中文名称 | GFP 标记的 RWPE-1 稳转株 |
Lot number | RWPE-1-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | K-SFM + 0.05 mg/mL BPE + 5 ng/mL EGF + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
RWPE-1-GFP-Puro 稳转株概述
RWPE-1 细胞是一种源自正常人类前列腺上皮的永生化细胞系，通常用于前列腺生物学、肿瘤发生机制等研究。**GFP（绿色荧光蛋白）** 是常用的报告基因，通过基因工程手段将 GFP 编码序列导入细胞后，可通过荧光显微镜直接观察细胞的状态、定位或迁移等。**Puro（嘌呤霉素）** 是一种抗生素，常用于稳转株筛选，携带 Puro 抗性基因的细胞可在含嘌呤霉素的培养基中存活，而未成功转染的细胞则被淘汰。
关键特性：
稳转株构建目的
通过慢病毒或质粒载体将 GFP 基因和 Puro 抗性基因稳定整合到 RWPE-1 细胞的基因组中，实现 GFP 的持续表达，便于长期追踪细胞或进行荧光相关实验（如流式细胞术、荧光成像等）。
利用 Puro 抗性筛选确保转染细胞的纯度，排除未成功整合外源基因的细胞。
应用场景
细胞成像与追踪：GFP 的荧光特性可实时观察细胞在培养或动物模型中的分布、增殖或凋亡。
基因表达研究：作为报告基因，GFP 可用于监测目标基因的表达水平或启动子活性（如与目标基因构建融合蛋白）。
细胞分选与纯化：通过流式细胞术（FACS）基于 GFP 荧光强度筛选高表达细胞亚群。
药物筛选或毒性研究：结合 Puro 抗性，可在药物处理实验中维持稳转株的稳定性。
培养与筛选要点
培养基：通常使用适合 RWPE-1 细胞的培养基（如角质细胞培养基或特定配方），并添加 Puro（浓度需预实验优化，一般为 0.5–2 µg/mL）以维持抗性。
荧光检测条件：激发波长约 488 nm，发射波长约 509 nm，需使用适配 GFP 的荧光显微镜或流式细胞仪。
传代注意事项：长期培养时需定期验证 GFP 表达稳定性，避免因传代次数过多导致基因丢失。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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