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MDA-MB-435S-GFP-Puro稳转株
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详细内容
MDA-MB-435S-GFP-Puro稳转株
英文名称 | MDA-MB-435S-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1475 |
中文名称 | GFP 标记的 MDA-MB-435S 稳转株 |
Lot number | MDA-MB-435S-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 纺锤形细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | L-15 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞来源:MDA - MB - 435S 细胞是 MDA - MB - 435 细胞的一个亚型,最初是从一位 31 岁患有转移性乳腺导管腺癌女性的胸腔积液中分离得到的。不过,有研究表明 MDA - MB - 435 细胞可能存在黑色素细胞起源,其与 M14 黑色素瘤细胞系有交叉污染的可能。
构建过程:通过将表达绿色荧光蛋白(GFP)的基因和带有嘌呤霉素(Puro)抗性基因的慢病毒载体感染 MDA - MB - 435S 细胞,使这些基因整合到细胞的基因组中。然后利用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了目的基因并稳定表达的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,最终得到稳定转染的 MDA - MB - 435S - GFP - Puro 细胞株。
特点及应用:
可视化标记:由于表达 GFP,在荧光显微镜下可以直接观察到细胞发出绿色荧光,便于对细胞进行追踪、定位以及观察细胞的生长、迁移、分化等生物学行为,也可用于研究细胞内的各种生理过程。
药物筛选标记:细胞具有嘌呤霉素抗性,在培养过程中加入嘌呤霉素可以维持对稳转细胞的筛选压力,保证细胞群体中稳定转染的细胞能够持续生长和传代,同时也可以防止未转染或丢失目的基因的细胞过度生长。
作为细胞模型:可用于研究基因功能,通过观察目的基因在该细胞株中的表达情况以及对细胞表型的影响,来探究基因的生物学功能。还可用于生物医药生产应用,如在药物研发中作为靶点细胞,筛选能够作用于该细胞的药物,或者用于生产重组蛋白、制备抗体等。
在培养 MDA - MB - 435S - GFP - Puro 稳转株时,通常使用含有 10% 胎牛血清、1% 青霉素 - 链霉素的 DMEM 培养基,培养条件为 37℃、5%CO2 。需要注意的是,细胞培养过程要保持无菌操作,防止污染,同时定期进行细胞传代和换液,以维持细胞的良好生长状态。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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