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MDA-MB-415-GFP-Puro稳转株
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详细内容
MDA-MB-415-GFP-Puro稳转株
英文名称 | MDA-MB-415-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1471 |
中文名称 | GFP 标记的 MDA-MB-415 稳转株 |
Lot number | MDA-MB-415-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | L-15 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

MDA-MB-415-GFP-Puro 稳转株概述
MDA-MB-415 是一种源自人乳腺癌的细胞系,属于三阴性乳腺癌(TNBC)模型,具有高侵袭性和转移性。GFP(绿色荧光蛋白)和 Puro(嘌呤霉素抗性基因)是常用的报告基因和筛选标记,通过基因工程技术构建的 MDA-MB-415-GFP-Puro 稳转株 具有以下特性和应用:
一、基本特性
细胞来源与背景
来源:人乳腺癌,三阴性(ER⁻/PR⁻/HER2⁻),恶性程度高,常用于乳腺癌转移机制研究。
特性:高侵袭性,体外可形成肿瘤球体,体内具有肺转移能力。
基因修饰
GFP 标记:通过慢病毒或质粒转染导入 GFP 基因,使细胞稳定表达绿色荧光,便于通过荧光显微镜、流式细胞术(FACS)或活体成像技术追踪细胞分布、迁移和增殖。
Puro 抗性基因:赋予细胞对嘌呤霉素的抗性,用于筛选成功转染的细胞克隆(未整合目的基因的细胞会被嘌呤霉素杀死)。
培养与筛选
培养基:通常使用 RPMI 1640 或 DMEM 培养基,添加 10% 胎牛血清(FBS)、1% 双抗(青霉素 / 链霉素)。
筛选条件:转染后需用嘌呤霉素(浓度约 1-5 µg/mL,需预实验优化)维持筛选,直至获得稳定单克隆细胞株。
二、主要应用场景
肿瘤生物学研究
细胞迁移与侵袭:通过 Transwell 实验或划痕愈合实验,利用 GFP 荧光直观观察细胞运动能力。
体内转移模型:将 GFP 标记的细胞接种到免疫缺陷小鼠(如裸鼠)体内,通过活体荧光成像监测肿瘤生长和转移(如肺、骨转移)。
药物筛选与疗效评估
用于评估抗肿瘤药物对三阴性乳腺癌细胞的增殖抑制、凋亡诱导或转移抑制作用,GFP 信号强度可反映细胞存活数量。
结合荧光激活细胞分选(FACS),筛选耐药细胞亚群或药物处理后的细胞表型变化。
分子机制研究
作为载体用于过表达或敲低特定基因(如与转移相关的蛋白),结合 GFP 标记追踪基因功能变化对细胞行为的影响。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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