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BT-549-GFP-Puro稳转株
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详细内容
BT-549-GFP-Puro稳转株
英文名称 | BT-549-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1477 |
中文名称 | GFP 标记的 BT-549 稳转株 |
Lot number | BT-549-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 0.023 IU/mL insulin + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

BT-549 细胞系
BT-549 细胞是 1978 年由 W.G.Coutinho 和 E.Y.Lasfargues 从一名 72 岁的白人女性乳腺癌患者乳头状浸润性导管肿瘤中分离的上皮细胞。该细胞系属于三阴性乳腺癌细胞系,具有高度恶性,拥有高浸润性和高转移性,并且存在多种肿瘤相关基因的突变或缺陷,如 TP53、BRCA1、P16INK4a 和 PTEN 等,是研究三阴性乳腺癌发病机制的重要细胞模型,也被广泛用于研究分子靶向药研发、化学药筛选、肿瘤免疫学研究等。
GFP 和 Puro 的作用
GFP:即绿色荧光蛋白,在细胞生物学研究中常被用作报告基因。它可以在荧光显微镜下发出绿色荧光,便于研究者直观地观察细胞的位置、形态、迁移等情况,以及追踪细胞内特定蛋白质的定位和动态变化,为研究细胞的生物学行为提供了一种简便而直观的方法。
Puro:即嘌呤霉素,是一种抗生素。在稳转株构建过程中,它被用作筛选标记。只有成功导入了含有 Puro 抗性基因载体的细胞,才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活并继续生长,而未成功转染的细胞则会被嘌呤霉素杀死,从而实现对稳转细胞株的筛选。
稳转株构建
通常是通过慢病毒感染的方式将含有 GFP 基因和 Puro 抗性基因的载体导入 BT-549 细胞。慢病毒载体能够将外源 DNA 整合到宿主细胞的基因组中,使 GFP 基因在细胞中持续稳定表达。在感染后的细胞群体中,利用嘌呤霉素进行筛选,只有那些成功整合了外源基因并表达 Puro 抗性蛋白的细胞才能存活下来,经过一段时间的筛选和培养,即可得到稳定表达 GFP 的 BT-549-GFP-Puro 稳转株。
应用
该稳转株在癌症研究中具有广泛的应用。例如,在肿瘤细胞的体内成像研究中,将 BT-549-GFP-Puro 稳转株接种到动物模型中,通过荧光成像技术可以实时观察肿瘤细胞在体内的生长、转移和侵袭情况,为研究肿瘤的发生发展机制以及评估抗肿瘤药物的疗效提供了有力的工具。此外,还可用于研究肿瘤细胞与周围微环境的相互作用,以及筛选能够影响肿瘤细胞生物学行为的小分子化合物或生物制剂等。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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