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MDA-MB-415-RFP-Puro稳转株
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详细内容
MDA-MB-415-RFP-Puro稳转株
英文名称 | MDA-MB-415-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1472 |
中文名称 | RFP 标记的 MDA-MB-415 稳转株 |
Lot number | MDA-MB-415-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | L-15 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

构建原理:通常是将携带红色荧光蛋白(RFP)基因和嘌呤霉素(Puro)抗性基因的表达载体,通过慢病毒感染或其他转染方法导入 MDA-MB-415 细胞中。载体中的 RFP 基因可使细胞稳定表达红色荧光蛋白,便于对细胞进行追踪和观察;Puro 抗性基因则用于在细胞培养过程中,通过嘌呤霉素筛选出成功转染并稳定整合了外源基因的细胞,从而得到 MDA-MB-415-RFP-Puro 稳转株。
细胞特性:
荧光特性:由于表达 RFP,在荧光显微镜或其他合适的成像系统下,可发出红色荧光。这一特性使得研究人员能够方便地对细胞进行定位、追踪其在体内外的迁移和分布等。例如,在细胞共培养实验中,可通过红色荧光将 MDA-MB-415-RFP-Puro 稳转株与其他细胞区分开来,观察它们之间的相互作用。
抗性特性:对嘌呤霉素具有抗性。在含有嘌呤霉素的培养基中,未成功转染的细胞会因不能抵抗嘌呤霉素的作用而死亡,只有稳定转染了含有 Puro 抗性基因载体的 MDA-MB-415 细胞才能存活并继续增殖,从而保证了细胞群体的稳定性和均一性。
细胞形态与生长特性:MDA-MB-415 细胞本身是上皮样细胞,贴壁生长。构建成稳转株后,其基本的细胞形态和生长特性通常不会发生明显改变,但可能由于外源基因的表达,在生长速度、细胞周期等方面会有一些细微变化,不过具体情况还需根据实验观察来确定。
应用领域:
细胞生物学研究:作为一种标记细胞株,可用于研究细胞的生物学行为,如细胞的增殖、分化、凋亡等过程。例如,通过观察红色荧光的变化,可以了解在不同培养条件下或受到不同刺激时,细胞的动态变化情况。
肿瘤学研究:MDA-MB-415 细胞来源于乳腺腺癌胸水转移灶,MDA-MB-415-RFP-Puro 稳转株可用于肿瘤细胞的体内外研究。在体外,可研究肿瘤细胞的侵袭、迁移能力等;在体内,将其接种到动物模型中,利用红色荧光标记,可直观地观察肿瘤的生长、转移以及对治疗的反应等。
药物研发:可作为药物筛选的细胞模型。例如,筛选针对 MDA-MB-415 细胞的抗肿瘤药物时,利用其红色荧光特性,可通过观察药物处理后细胞的存活情况、荧光强度变化等,来评估药物的疗效和作用机制。同时,由于其对嘌呤霉素的抗性,在进行药物筛选时可以排除其他非特异性药物对细胞的影响。
培养与保存:培养条件通常与原始的 MDA-MB-415 细胞相似,一般使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 高糖培养基,在 37℃、5%CO2 培养箱中培养。在传代过程中,要注意控制传代比例和时间,避免细胞过度生长导致状态不佳。保存时,通常采用液氮冻存的方法,将细胞冻存于含有 10% DMSO 和 90% 胎牛血清的冻存液中,以便长期保存和后续使用。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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