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BT-549-RFP-Puro稳转株
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详细内容
BT-549-RFP-Puro稳转株
英文名称 | BT-549-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1478 |
中文名称 | RFP 标记的 BT-549 稳转株 |
Lot number | BT-549-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 0.023 IU/mL insulin + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

BT-549 细胞系:BT-549 细胞是 1978 年由 W.G.Coutinho 和 E.Y.Lasfargues 从一名 72 岁白人女性乳腺癌患者的乳头状浸润性导管肿瘤中分离得到的,该肿瘤已转移至 7 个区域淋巴结中的 3 个。BT-549 细胞属于人乳腺管癌细胞系,在研究乳腺癌的发生、发展、侵袭和转移等方面具有重要作用。
RFP 标记:RFP 是红色荧光蛋白(Red Fluorescent Protein)的缩写。在 BT-549-RFP-Puro 稳转株中,RFP 基因通常被导入到 BT-549 细胞的基因组中,使得细胞能够稳定表达红色荧光蛋白。RFP 可以作为一种报告基因,用于监测细胞的状态、定位和追踪细胞在体内外的分布情况等。例如,在细胞生物学实验中,可以通过荧光显微镜观察 RFP 的荧光信号,来确定转染细胞的位置和数量,或者研究细胞内蛋白质的定位和运输等过程。
Puro 抗性:Puro 是嘌呤霉素(Puromycin)的缩写。嘌呤霉素是一种抗生素,能够抑制细胞蛋白质的合成,从而杀死不含有 Puro 抗性基因的细胞。在构建 BT-549-RFP-Puro 稳转株时,携带 RFP 基因的载体通常还会同时携带 Puro 抗性基因。在细胞转染后,使用含有嘌呤霉素的培养基进行筛选,只有那些成功转染了载体并整合到基因组中的细胞,才能够表达 Puro 抗性蛋白,从而在筛选压力下存活下来,形成稳定转染的细胞株。
稳转株构建:一般是通过慢病毒感染或质粒转染的方法将含有 RFP 基因和 Puro 抗性基因的载体导入 BT-549 细胞。慢病毒感染法具有高效整合、宿主范围广、感染效率高等优点,是目前制备稳转细胞株的常用方法。转染后,利用嘌呤霉素进行筛选,得到能够稳定表达 RFP 的 BT-549 细胞群体,即 BT-549-RFP-Puro 稳转株。
应用:这种稳转株在乳腺癌研究中具有多种应用。比如,可用于研究乳腺癌细胞在体内的生长、转移和侵袭机制,通过将稳转株接种到动物模型中,利用 RFP 的荧光特性追踪肿瘤细胞的分布和扩散情况;还可以用于筛选针对乳腺癌细胞的药物,通过观察药物处理后稳转株细胞的生长、凋亡等变化,评估药物的疗效。此外,在细胞生物学研究中,可作为模型细胞来研究细胞信号通路、基因表达调控等基本生物学过程。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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