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MDA-KB2-RFP-Puro稳转株
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详细内容
MDA-KB2-RFP-Puro稳转株
英文名称 | MDA-KB2-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1490 |
中文名称 | RFP 标记的 MDA-KB2 稳转株 |
Lot number | MDA-KB2-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | L-15 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

相关背景:MDA - KB2 细胞株是 1998 年从一位 48 岁白人女性乳腺癌患者的乳房中分离出来的上皮细胞系,可用于筛选雄激素受体和糖皮质激素受体介导的化学物质。它是由 MDA - MB - 453 乳腺癌细胞系通过稳定转染小鼠乳腺肿瘤病毒(MMTV)荧光素酶 - 新霉素报告基因构建体而得到的。
构建过程:通常是将含有目的基因(如 RFP,红色荧光蛋白基因)以及嘌呤霉素抗性基因(Puro)的表达载体,通过慢病毒感染或转染等方法导入 MDA - KB2 细胞中。载体进入细胞后,其携带的 DNA 会整合到 MDA - KB2 细胞的染色体上,使细胞获得稳定表达 RFP 和对嘌呤霉素具有抗性的能力。利用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了外源基因的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活并稳定传代,从而得到 MDA - KB2 - RFP - Puro 稳转株。
应用:
荧光标记与示踪:RFP 作为一种荧光蛋白,在细胞生物学研究中可作为报告基因,用于实时观察细胞的状态、位置以及细胞内的各种生理过程。例如,在细胞迁移实验中,可通过观察 RFP 的荧光来追踪 MDA - KB2 细胞的迁移轨迹;在细胞共培养实验中,可通过 RFP 荧光区分 MDA - KB2 细胞与其他细胞。
药物筛选与抗性研究:由于该稳转株具有嘌呤霉素抗性,可用于研究细胞在药物压力下的生长、增殖以及基因表达变化等。同时,也可作为模型来筛选其他具有潜在抗肿瘤或细胞生长调节作用的药物,观察这些药物对 MDA - KB2 细胞的影响,而嘌呤霉素抗性基因可作为一个稳定的筛选标记,确保实验中使用的细胞是稳定转染了目的基因的细胞。
基因功能研究:如果目的基因 RFP 与某些特定的细胞功能或信号通路相关,那么通过对 MDA - KB2 - RFP - Puro 稳转株的研究,可以深入了解这些基因在细胞中的功能以及它们对细胞生长、分化、凋亡等过程的调控机制。例如,若 RFP 与细胞的增殖信号通路相关,可通过观察稳转株在不同培养条件下的增殖情况,来研究该信号通路的激活与抑制机制。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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