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MCF-10A-GFP-Puro稳转株
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详细内容
MCF-10A-GFP-Puro稳转株
英文名称 | MCF-10A-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1491 |
中文名称 | GFP 标记的 MCF-10A 稳转株 |
Lot number | MCF-10A-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

MCF-10A 细胞系:MCF-10A 细胞于 1984 年从患有纤维囊性乳房的 36 岁白人女性的乳腺中分离出来,是一种非致瘤性上皮细胞系。该细胞在胶原蛋白中表现出三维生长,并在融合培养物中形成圆顶。培养基中的钙含量对细胞的形态有很大影响,且细胞对胰岛素、糖皮质激素、霍乱肠毒素和表皮生长因子(EGF)有反应。
GFP 标记:绿色荧光蛋白(GFP)在细胞中可作为报告基因,方便科研人员对细胞进行观察和追踪。在 MCF-10A-GFP-Puro 稳转株中,GFP 基因已整合到细胞基因组中,细胞可稳定、高水平表达 GFP 蛋白。通过荧光显微镜,能直接观察到发出绿色荧光的细胞,便于在体外培养过程中随时监测细胞的生长、增殖、迁移等情况,也有助于在动物模型中追踪细胞的分布和命运,例如观察其在体内形成肿瘤的过程或向其他组织器官的转移情况。
Puro 抗性:嘌呤霉素(Puro)是一种抗生素,在细胞培养中常被用于筛选含有相应抗性基因的细胞。MCF-10A-GFP-Puro 稳转株具有 Puro 抗性基因,这意味着在含有嘌呤霉素的培养基中,只有成功转入了带有 Puro 抗性基因载体的细胞才能存活并生长,而未成功转染的细胞则会被杀死。利用这一特性,可在细胞转染后通过添加嘌呤霉素进行筛选,从而获得稳定表达 GFP 的 MCF-10A 细胞株。
构建过程:一般是通过慢病毒感染等方式,将携带 GFP 基因和 Puro 抗性基因的载体导入 MCF-10A 细胞。载体进入细胞后,其 DNA 会整合到细胞的染色体中,使细胞获得稳定表达 GFP 和抵抗嘌呤霉素的能力。随后,在含有嘌呤霉素的选择培养基中进行筛选,只有那些成功整合了外源基因的细胞才能存活下来,经过一段时间的培养和筛选,即可得到 MCF-10A-GFP-Puro 稳转株。
应用领域:在肿瘤研究方面,可作为研究肿瘤细胞的理想工具,例如通过观察 GFP 荧光来研究肿瘤细胞的生长、侵袭和转移规律。还可用于药物研发,利用该稳转株筛选对 MCF-10A 细胞有作用的药物,观察药物对细胞生长、凋亡等方面的影响,为乳腺癌等相关疾病的药物开发提供实验依据。同时,在细胞生物学研究中,有助于深入了解细胞的生物学特性,如细胞的增殖、分化、凋亡等过程。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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