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HMC-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
HMC-GFP-Puro稳转株
英文名称 | HMC-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1511 |
中文名称 | GFP 标记的 HMC 稳转株 |
Lot number | HMC-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
HMC-GFP-Puro 稳转株概述
HMC-GFP-Puro 稳转株是一种通过基因工程技术构建的细胞株，通常用于生物学研究（如基因表达分析、细胞追踪、药物筛选等）。以下从其组成、构建原理、应用场景和操作注意事项等方面展开说明：
一、核心组成与原理
HMC
通常指某种靶细胞或组织来源的细胞系（如肿瘤细胞、正常体细胞等），具体需结合研究背景确定（例如可能是某种特定癌细胞株的缩写）。
作用：作为稳转株的宿主细胞，提供基因表达的环境。
GFP（绿色荧光蛋白）
功能：作为报告基因，表达后可发出绿色荧光，用于实时观察细胞状态、定位目标蛋白或追踪细胞在体内外的分布。
优势：荧光信号强、对细胞毒性低，适用于活细胞成像和长期追踪。
Puro（嘌呤霉素）
作用：作为筛选标记基因，赋予细胞对嘌呤霉素的抗性。在稳转株构建过程中，未成功整合目的基因的细胞会被嘌呤霉素杀死，从而筛选出稳定表达目标基因的细胞株。
原理：通过质粒载体或病毒载体（如慢病毒、逆转录病毒）将 GFP 基因和嘌呤霉素抗性基因共同导入宿主细胞，经药物筛选后获得稳定整合目的基因的细胞克隆。
二、构建流程
载体构建
设计含 GFP 基因和嘌呤霉素抗性基因的表达载体（如质粒），通常与目的基因（如需研究的靶基因）共表达，或直接以 GFP 为研究对象。
载体需包含启动子、终止子等调控元件，确保基因稳定表达。
细胞转染 / 感染
方法：
对于易转染的细胞（如 HEK293T），可采用脂质体转染或电穿孔法。
对于难转染的细胞，常用慢病毒包装系统进行感染，提高转染效率。
药物筛选
转染 / 感染后，用嘌呤霉素处理细胞，未成功整合抗性基因的细胞死亡，存活细胞形成稳定克隆（即稳转株）。
通常需持续筛选 2-4 周，直至获得单克隆细胞株。
鉴定与扩增
通过荧光显微镜观察 GFP 表达情况，验证稳转株是否成功。
对阳性克隆进行单克隆化（如有限稀释法），确保细胞株的均一性，随后扩大培养并冻存备用。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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