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Caki-1-RFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
Caki-1-RFP-Puro稳转株
英文名称 | Caki-1-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1502 |
中文名称 | RFP 标记的 Caki-1 稳转株 |
Lot number | Caki-1-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | McCoy’s5AMedia + 10%FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
Caki-1 细胞：Caki-1 细胞来源于一名男性肾透明细胞癌患者肾静脉壁上的肿瘤转移部位，具有上皮样形态，呈贴壁生长，常被用于肾癌生物学机制的研究，特别是在理解肾透明细胞癌的发生发展机制方面应用广泛。
RFP 的作用：RFP 即红色荧光蛋白，在 Caki - 1 - RFP - Puro 稳转株中，它通常与目标蛋白融合表达。利用 RFP 独特的荧光性质和灵敏性，通过激光共聚焦显微镜等设备，在激光照射下 RFP 会发出红色荧光，科研人员可根据荧光在细胞内显示的位置，来确定目标蛋白的亚细胞定位情况，进而对蛋白质进行精确定位，也可用于示踪细胞内的蛋白。
Puro 的作用：Puro 是嘌呤霉素的缩写，在构建稳转株过程中起着筛选标记的重要作用。将携带目的基因（如与 RFP 融合的基因）以及嘌呤霉素抗性基因的载体转染到 Caki - 1 细胞后，只有那些成功整合了外源 DNA 的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活并稳定表达目的蛋白，未成功转染的细胞则会被嘌呤霉素杀死，从而筛选得到稳定表达目的基因的 Caki - 1 - RFP - Puro 稳转株细胞。
构建方法：通常先构建慢病毒载体，将包含 RFP 基因、Puro 抗性基因以及可能有的其他目的基因的 DNA 片段克隆到慢病毒载体上。然后进行慢病毒包装，用构建好的慢病毒载体转染 293T 细胞等包装细胞系，获得具有感染能力的慢病毒颗粒。接着用慢病毒感染 Caki - 1 细胞，使病毒携带的外源基因整合到 Caki - 1 细胞的染色体中。，利用嘌呤霉素进行筛选，在筛选过程中，未成功整合外源基因的细胞因不具有嘌呤霉素抗性而死亡，存活下来的细胞即为稳定表达 RFP 及其他目的基因的 Caki - 1 - RFP - Puro 稳转株细胞。
应用领域：在肾癌研究中，可通过该稳转株研究特定基因在肾癌发生发展中的作用机制，例如将与肿瘤增殖、侵袭、转移等相关的基因构建到该稳转株中，观察其对 Caki - 1 细胞生物学行为的影响。在药物研发领域，可利用该稳转株筛选针对肾癌的潜在治疗药物，通过观察药物对稳转株细胞生长、增殖、凋亡等的影响，评估药物的疗效和作用机制。同时，还可用于研究蛋白质之间的相互作用，借助 RFP 的荧光特性，通过荧光共振能量转移等技术，分析目标蛋白与其他蛋白在 Caki - 1 细胞内的相互作用情况。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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