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293FT-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
293FT-GFP-Puro稳转株
英文名称 | 293FT-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1523 |
中文名称 | GFP 标记的 293FT 稳转株 |
Lot number | 293FT-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
293FT-GFP-Puro 稳转株概述
293FT 细胞是基于人胚肾 293 细胞（HEK293）改造的细胞系，常用于病毒包装（如慢病毒、逆转录病毒），因其高效的转染能力和病毒生产效率而被广泛应用于基因治疗、细胞生物学研究等领域。
**GFP（绿色荧光蛋白）** 作为报告基因，可通过荧光显微镜直接观察细胞内表达情况，用于监测转染效率、细胞定位或示踪研究。
**Puro（嘌呤霉素）** 是一种抗生素，用于稳转株筛选 —— 通过质粒共表达 Puro 抗性基因，可在培养基中添加嘌呤霉素，选择性保留成功整合目标基因的细胞克隆。
构建流程（示例）
载体设计：构建含 GFP 编码序列、Puro 抗性基因及目标基因的表达载体（如慢病毒载体）。
细胞转染：使用脂质体转染或电穿孔法将载体导入 293FT 细胞。
筛选与克隆化：
转染后 48–72 小时加入嘌呤霉素，未成功整合载体的细胞死亡。
持续筛选 2–3 周，通过有限稀释法或单细胞分选获得单克隆稳转株。
鉴定：
荧光显微镜观察 GFP 表达强度及细胞形态。
Western blot 检测目标蛋白表达水平。
流式细胞术分析 GFP 阳性细胞比例（通常需＞95% 纯度）。
培养与维护要点
培养基：常用 DMEM（高糖）+10% 胎牛血清（FBS）+1% 双抗（青霉素 / 链霉素），维持培养时可保留嘌呤霉素（浓度需低于筛选浓度，避免细胞毒性）。
培养条件：37℃、5%CO2 ，贴壁生长，传代时用胰酶消化（注意避免过度消化影响荧光表达）。
冻存与复苏：冻存液建议使用 90% FBS+10% DMSO，液氮保存；复苏时快速解冻，次日换液以去除 DMSO。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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