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HEK-293-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
HEK-293-GFP-Puro稳转株
英文名称 | HEK-293-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1513 |
中文名称 | GFP 标记的 HEK-293 稳转株 |
Lot number | HEK-293-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
HEK-293-GFP-Puro 稳转株概述
HEK-293 细胞是一种常用的人胚肾细胞系，因其易于培养、转染效率高且蛋白表达能力强，被广泛应用于基因表达、蛋白生产、病毒包装等生物医学研究领域。
**GFP（绿色荧光蛋白）** 作为报告基因，可通过荧光显微镜直接观察细胞内的表达情况，用于追踪细胞、监测基因表达或蛋白定位。
Puro（嘌呤霉素）是一种抗生素，常用于筛选成功整合外源基因的稳转细胞株 —— 只有携带Puro 抗性基因的细胞才能在含嘌呤霉素的培养基中存活。
HEK-293-GFP-Puro 稳转株的构建流程
载体构建
将GFP 基因和Puro 抗性基因插入到合适的表达载体（如质粒）中，形成重组载体。
载体通常包含启动子（如 CMV 启动子）以驱动基因表达。
细胞转染
使用脂质体转染、电穿孔等方法将重组载体导入 HEK-293 细胞。
抗性筛选
转染后，在培养基中添加嘌呤霉素，未成功整合载体的细胞会被杀死，存活下来的细胞即为稳定表达 GFP 的稳转株。
单克隆筛选与鉴定
通过有限稀释法或流式细胞术筛选单克隆细胞，确保 GFP 表达的均一性。
利用荧光显微镜、流式细胞术（FACS）检测 GFP 荧光强度，验证稳转株的稳定性。
主要应用场景
基因表达与蛋白研究
通过 GFP 荧光直观观察外源基因的表达效率和亚细胞定位。
结合免疫荧光或 Western blot 技术，分析蛋白的合成、转运及相互作用。
病毒包装系统
HEK-293 细胞是慢病毒、腺病毒等病毒载体包装的常用宿主。
GFP 标记可用于追踪病毒感染效率，Puro 筛选则确保包装细胞株的稳定性。
细胞示踪与体内研究
将稳转株移植到动物模型中，通过荧光成像追踪细胞在体内的分布、增殖或分化（如肿瘤研究、干细胞追踪）。
药物筛选与毒性检测
利用 GFP 荧光强度变化反映细胞状态（如凋亡、应激），高通量筛选药物或化合物的生物学效应。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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