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HEK-293-RFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
HEK-293-RFP-Puro稳转株
英文名称 | HEK-293-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1514 |
中文名称 | RFP 标记的 HEK-293 稳转株 |
Lot number | HEK-293-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
HEK-293-RFP-Puro 稳转株概述
HEK-293 细胞是一种常用的人胚肾细胞系，因易于培养、转染效率高且蛋白表达能力强，被广泛应用于基因编辑、蛋白生产、病毒包装等生物医学研究领域。
RFP（Red Fluorescent Protein，红色荧光蛋白）是一种报告基因，可通过荧光显微镜或流式细胞术直观追踪细胞，监测基因表达、细胞定位或细胞存活状态。
Puro（Puromycin，嘌呤霉素）是一种抗生素，用于稳转株筛选。含Puro 抗性基因的细胞可在嘌呤霉素存在的培养基中存活，未成功整合目的基因的细胞则被淘汰，从而获得稳定表达目标蛋白的细胞株。
HEK-293-RFP-Puro 稳转株的构建流程
载体构建
将 RFP 基因与 Puro 抗性基因插入到合适的表达载体（如质粒）中，形成重组载体。
载体需包含启动子（如 CMV 启动子）以驱动基因转录。
细胞转染
使用脂质体转染、电穿孔等方法将重组载体导入 HEK-293 细胞。
筛选与克隆化
转染后加入嘌呤霉素培养基，未成功整合载体的细胞死亡，存活细胞为初步筛选的稳转株。
通过有限稀释法或单细胞分选技术进行克隆化，获得单细胞来源的纯稳转株，确保基因表达的均一性。
鉴定与验证
荧光检测：通过荧光显微镜观察细胞是否稳定表达 RFP，确认荧光强度和细胞存活率。
分子生物学验证：利用 PCR、Western blot 等技术检测 RFP 基因的整合及蛋白表达水平。
主要应用场景
细胞示踪与成像研究
RFP 荧光信号可用于实时追踪细胞在体内外的迁移、增殖或分化过程，例如在肿瘤细胞侵袭实验或组织工程中标记细胞。
药物筛选与毒性评估
通过监测 RFP 阳性细胞比例变化，快速评估药物对细胞存活的影响，或用于高通量筛选具有特定生物学效应的化合物。
基因编辑与载体系统优化
作为模型细胞株验证 CRISPR-Cas9 等基因编辑工具的效率，或优化病毒载体（如慢病毒、腺相关病毒）的包装和感染条件。
蛋白表达与生产
利用 HEK-293 细胞的高效表达能力，生产带有 RFP 标签的融合蛋白，便于后续纯化和功能研究。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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