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上海信裕生物科技有限公司 主营产品:ELISA试剂盒价格,检测试剂盒,白介素试剂盒,试剂盒价格,重组蛋白,单克隆抗体,多克隆抗体

第11年

当前位置: 阿仪网 > 生物试剂/抗体/细胞 > 细胞生物学 > 细胞/细胞株 > 上海信裕生物科技有限公司 > 产品展示 > 细胞 > 人细胞株 > AD293-GFP-Puro稳转株

AD293-GFP-Puro稳转株

价格:¥ 电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/19 10:48:49

产品摘要:AD293-GFP-Puro稳转株是一种常用的人胚肾细胞系,具有高效的转染能力和蛋白表达能力,广泛应用于病毒包装、基因表达研究等领域。**GFP(绿色荧光蛋白)** 作为报告基因,常用于标记细胞或蛋白,便于通过荧光显微镜观察或流式细胞术分选。

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旗舰版网址:http://www.xybio-sh.com

详细内容

AD293-GFP-Puro稳转株

英文名称

AD293-GFP-Puro polyclonal stable cell line

产品货号

XY-H1515

中文名称

GFP 标记的 AD293 稳转株

Lot number

AD293-10A1P

细胞规格

复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞

细胞形态

上皮细胞样

生长特性

贴壁生长

细胞株

构建流程

(1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒;

(2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞;

(3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株;

(4)稳转株质检(COA)。

完全培养基

DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加)

培养条件

(1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。

细胞冻存

无血清冻存液

存储条件

液氮

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AD293-GFP-Puro 稳转株概述

AD293 细胞是一种常用的人胚肾细胞系,具有高效的转染能力和蛋白表达能力,广泛应用于病毒包装、基因表达研究等领域。**GFP(绿色荧光蛋白)** 作为报告基因,常用于标记细胞或蛋白,便于通过荧光显微镜观察或流式细胞术分选。**Puro(嘌呤霉素)** 是一种抗生素,常用于稳转株的筛选 —— 通过构建含嘌呤霉素抗性基因的载体,转染后用嘌呤霉素处理细胞,未成功整合目的基因的细胞会被杀死,存活细胞即为稳定表达目标基因的稳转株。

关键特性

特性 说明

细胞来源 人胚肾细胞(HEK293 衍生株),贴壁生长,易培养。

表达系统 含 GFP 报告基因,可通过荧光信号直观监测细胞状态或基因表达;携带 Puro 抗性基因,便于筛选。

应用场景 - 基因功能研究(如蛋白定位、细胞追踪)

- 病毒包装(如慢病毒、腺病毒)

- 蛋白生产与分泌研究

筛选机制 转染后用嘌呤霉素(Puro)筛选,仅整合了抗性基因和目的基因的细胞可存活。

构建流程(示意图)

载体构建:将 GFP 基因和 Puro 抗性基因插入目标载体(如质粒),形成重组载体。

细胞转染:通过脂质体转染、电穿孔等方法将重组载体导入 AD293 细胞。

筛选与扩增:

转染后 48⁻⁷2 小时加入嘌呤霉素(浓度需预实验优化,通常 5-10 µg/mL)。

未成功转染的细胞逐渐死亡,存活细胞形成单克隆并扩大培养。

鉴定:

荧光显微镜观察 GFP 表达(绿色荧光)。

流式细胞术检测 GFP 阳性率(通常要求 > 90%)。

分子生物学方法(如 Western blot)验证目标蛋白表达。

培养与维护要点

培养基:常用 DMEM 或 MEM 培养基,含 10% 胎牛血清(FBS),1% 双抗(青霉素 / 链霉素)。

筛选压力:构建成功后,可维持低浓度嘌呤霉素(如 1-2 µg/mL)防止抗性丢失。

传代注意:避免过度汇合(建议 80%-90% 汇合时传代),胰酶消化时间不宜过长,以免损伤细胞。

冻存与复苏:冻存液建议使用 90% FBS+10% DMSO,液氮保存;复苏时快速融化,避免 GFP 表达受冻存影响。

仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。

以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


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