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MKN-45-RFP-Puro稳转株
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详细内容
MKN-45-RFP-Puro稳转株
英文名称 | MKN-45-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1532 |
中文名称 | RFP 标记的 MKN-45 稳转株 |
Lot number | MKN-45-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁/悬浮生长,混合 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞来源:MKN-45 细胞系源于一位 62 岁患有低分化胃腺癌女性的胃淋巴结,而 MKN - 45 - RFP - Puro 稳转株是在 MKN-45 细胞的基础上构建的。
构建方式:通过慢病毒感染的方式将携带红色荧光蛋白(RFP)基因片段以及嘌呤霉素(Puro)抗性基因的载体整合进 MKN-45 细胞的基因组中,使得细胞能够稳定表达 RFP,并且对嘌呤霉素具有抗性。
筛选与鉴定:在细胞培养过程中,使用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了外源基因并稳定表达的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而获得稳定转染的细胞株。可以通过荧光显微镜观察细胞是否表达红色荧光来鉴定 RFP 的表达情况,也可以通过检测 Puro 抗性基因的存在来确认细胞是否成功转染。
应用领域:该稳转株在肿瘤学研究中具有重要作用,例如可用于肿瘤细胞的体内外示踪,观察肿瘤细胞在动物模型中的生长、转移和侵袭情况;还可用于药物研发,评估抗癌药物对肿瘤细胞的作用效果等。
培养条件:通常使用 RPMI 1640 培养基,添加 10% 的胎牛血清。传代时,悬浮部分离心收集(1000rpm,5 分钟),贴壁部分消化 2 - 3 分钟,按 1:3 的比例进行传代,每周换液 2 - 3 次。为了维持细胞对嘌呤霉素的抗性以及 RFP 的稳定表达,在正常培养过程中定期(一个月 2 - 3 次或频率自定)用终浓度 4ug/mL 的嘌呤霉素追加筛选,冻存后复苏也建议追加筛选一次。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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