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HPAC-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
HPAC-GFP-Puro稳转株
英文名称 | HPAC-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1537 |
中文名称 | GFP 标记的 HPAC 稳转株 |
Lot number | HPAC-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
1. 核心组成部分
HPAC：
可能是指特定的基因、蛋白或细胞背景。例如，HPAC 可能代表某种离子通道蛋白（如人类 pulmonary anion channel）或特定细胞系（需结合具体研究背景确认）。
GFP（绿色荧光蛋白）：
作为报告基因，GFP 在蓝光或紫外光激发下会发出绿色荧光，用于实时追踪细胞内目标蛋白的定位、表达水平或细胞动态（如迁移、分化）。
Puro（嘌呤霉素）：
是一种抗生素，用于稳转株的筛选和维持。通过将携带嘌呤霉素抗性基因的质粒转染细胞，只有成功整合外源基因的细胞才能在含嘌呤霉素的培养基中存活，从而获得稳定表达目标基因的细胞株。
2. 构建流程
载体设计：
构建包含目标基因（如 HPAC）、GFP 报告基因和嘌呤霉素抗性基因的重组质粒载体。
细胞转染：
通过脂质体转染、电穿孔等方法将载体导入宿主细胞（如哺乳动物细胞）。
筛选与扩增：
转染后用嘌呤霉素处理细胞，未成功整合质粒的细胞死亡，存活细胞形成稳转株，并通过有限稀释法或单克隆挑选获得纯克隆。
鉴定验证：
荧光显微镜检测 GFP 表达，确认转染效率。
Western blot 或 ELISA 检测 HPAC 蛋白的稳定表达水平。
功能实验（如离子通道活性测定）验证 HPAC 的生物学功能。
3. 应用场景
细胞成像与追踪：
GFP 的荧光特性便于通过显微镜观察细胞内 HPAC 的定位（如细胞膜、细胞质）或细胞群体的动态变化（如在肿瘤研究中追踪细胞迁移）。
药物筛选与毒性分析：
利用稳转株构建高通量筛选模型，通过 GFP 信号强度或细胞存活率（结合嘌呤霉素抗性）评估药物对 HPAC 功能的影响或细胞毒性。
基因功能研究：
稳定表达 HPAC-GFP 的细胞株可用于分析该基因的表达调控、蛋白互作或信号通路机制。
基因治疗预实验：
作为体外模型验证基因递送系统的效率和安全性（如病毒载体介导的基因转导）。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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