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MKN-74-GFP-Puro稳转株
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详细内容
MKN⁻⁷4-GFP-Puro稳转株
英文名称 | MKN⁻⁷4-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1529 |
中文名称 | GFP 标记的 MKN⁻⁷4 稳转株 |
Lot number | MKN⁻⁷4-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

背景信息:MKN⁻⁷4 是一种人胃癌细胞系,来源于 37 岁日本人胃癌转移到肝脏的管状腺癌,具有上皮细胞样形态,呈贴壁生长特性。
构建原理:将包含绿色荧光蛋白(GFP)基因和嘌呤霉素抗性(Puro)基因的外源 DNA,通过慢病毒感染等方式克隆到载体上,再将载体转染到 MKN - 74 细胞中,使外源 DNA 整合到 MKN - 74 细胞的染色体中。利用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了外源 DNA 并表达嘌呤霉素抗性蛋白的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而得到稳定表达 GFP 的 MKN - 74 - GFP - Puro 稳转株。
各部分作用:
GFP:绿色荧光蛋白可以作为一种报告基因,在细胞生物学和分子生物学研究中,能够直接监控生物体内细胞活动。其具有表达稳定、检测方便、结果直观等特点,便于研究人员通过荧光显微镜等设备对细胞进行观察和追踪,例如研究 MKN - 74 细胞在体内的迁移、分布、扩增和分化等生物学行为。
Puro:嘌呤霉素是一种氨基苷类抗生素,能够抑制蛋白质合成,从而杀死未成功转染的细胞。在筛选过程中,只有含有 Puro 抗性基因的细胞,即成功整合了外源 DNA 的 MKN - 74 细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中生长,起到筛选稳定转染细胞的作用。在稳转株的维持阶段,也可以使用嘌呤霉素来保证细胞持续稳定地表达目的基因。
应用领域:该稳转株主要应用于胃癌相关的研究。例如,借助 GFP 的荧光示踪,研究 MKN - 74 细胞在肿瘤发生、发展过程中的动态变化;还可以利用该细胞株研究相关基因的功能、筛选抗癌药物等,为胃癌的基础研究和临床治疗提供重要的实验依据。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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