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HEC-1-A-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
HEC-1-A-GFP-Puro稳转株
英文名称 | HEC-1-A-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1543 |
中文名称 | GFP 标记的 HEC-1-A 稳转株 |
Lot number | HEC-1-A-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | McCOY's5A + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
1. 基础背景
细胞来源：
HEC-1-A 细胞：人子宫内膜腺癌细胞系，源自子宫内膜腺癌组织，具有典型的上皮细胞形态，常用于子宫内膜癌的发病机制、药物敏感性等研究。
关键标签：
GFP（绿色荧光蛋白）：通过基因转染技术导入细胞，作为报告基因，用于实时观察细胞形态、定位及动态变化（如细胞迁移、分化），或追踪特定基因的表达。
Puro（嘌呤霉素）：用于筛选稳转株的抗性标记基因。转染后的细胞需在含有嘌呤霉素的培养基中培养，未成功整合目的基因的细胞会被杀死，最终获得稳定表达 GFP 的单克隆细胞株。
2. 构建流程
通常包括以下步骤：
载体构建：
将 GFP 基因和 Puro 抗性基因插入到合适的载体（如慢病毒载体、质粒）中，形成重组表达载体。
细胞转染：
通过脂质体转染、电穿孔或病毒感染（如慢病毒）等方法，将重组载体导入 HEC-1-A 细胞。
抗性筛选：
转染后的细胞在含嘌呤霉素的培养基中培养，存活细胞为成功整合目的基因的稳转株。
单克隆化：
通过有限稀释法或流式细胞分选（FACS）筛选出单克隆细胞，确保 GFP 表达稳定且均一。
3. 技术特点与应用
技术优势：
稳定表达：GFP 基因整合到细胞基因组中，可长期稳定表达，避免瞬时转染的荧光信号衰减问题。
可视化追踪：利用荧光显微镜或流式细胞术，直接观察细胞内 GFP 标记的蛋白定位、细胞周期或药物处理后的变化。
操作便捷：Puro 抗性筛选简化了稳转株的建立流程，适合大规模细胞培养和实验。
主要应用场景：
细胞生物学研究：观察细胞形态、增殖、凋亡或细胞间相互作用（如肿瘤细胞与免疫细胞的互作）。
基因功能研究：通过 GFP 标记目的蛋白，分析其亚细胞定位、动态分布及与其他分子的相互作用。
药物筛选与毒性检测：利用荧光强度变化评估药物对细胞活性的影响（如细胞存活率、凋亡率），或用于高通量筛选抗肿瘤药物。
动物体内成像：将稳转株注射到动物模型（如裸鼠）中，通过活体荧光成像追踪肿瘤生长和转移。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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