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MDA-MB-436-GFP-Puro稳转株
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详细内容
MDA-MB-436-GFP-Puro稳转株
英文名称 | MDA-MB-436-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1554 |
中文名称 | GFP 标记的 MDA-MB-436 稳转株 |
Lot number | MDA-MB-436-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | Leibovitz's L-15 medium with 10 mcg/ml insulin,90% 16 mcg/ml glutathione + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

MDA-MB-436-GFP-Puro 稳转株概述
MDA-MB-436 是一种人类乳腺癌细胞系,来源于转移性乳腺癌患者的胸腔积液,具有高度侵袭性和恶性特征,常用于癌症研究(如肿瘤细胞迁移、侵袭机制、药物敏感性等)。
GFP(绿色荧光蛋白) 在此稳转株中作为报告基因,通过基因工程手段稳定转染至细胞内,使细胞表达 GFP,便于通过荧光显微镜或流式细胞术等工具进行实时追踪、观察细胞形态或定位,或用于细胞分选、示踪实验。
Puro(嘌呤霉素) 是一种抗生素,用于稳转株的筛选。含有 Puro 抗性基因的细胞在嘌呤霉素存在的培养环境中可存活,未成功转染的细胞则被淘汰,从而确保获得稳定表达目标基因(如 GFP)的细胞株。
主要特性与应用
1. 细胞特性
来源:人类乳腺癌,转移性胸腔积液。
形态:上皮样细胞,贴壁生长。
基因特征:稳定表达 GFP 蛋白,携带 Puro 抗性基因。
增殖能力:体外培养时具有较强增殖能力,需定期传代。
2. 应用场景
荧光成像研究:通过 GFP 荧光信号观察细胞在体内外的分布、迁移、侵袭过程(如肿瘤转移模型)。
药物筛选:利用 GFP 标记追踪药物对细胞形态或功能的影响,或通过 Puro 抗性筛选共转染的其他目的基因。
细胞示踪实验:在动物模型(如裸鼠移植瘤)中标记肿瘤细胞,监测肿瘤生长和转移。
分子机制研究:结合 GFP 融合蛋白,研究特定蛋白的亚细胞定位或动态变化。
培养与维护要点
1. 培养基
通常使用 RPMI 1640 培养基,添加 10% 胎牛血清(FBS)、1% 双抗(青霉素 / 链霉素),并根据实验需求加入 嘌呤霉素(Puro,浓度一般为 0.5–2 µg/mL) 以维持稳转株的抗性筛选压力。
2. 培养条件
温度:37℃,5% CO2 培养箱。
传代:当细胞密度达 80%–90% 时进行消化传代,消化液常用 0.25% 胰酶 - EDTA。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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