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ECV-304-RFP-Puro稳转株
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详细内容
ECV-304-RFP-Puro稳转株
英文名称 | ECV-304-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1563 |
中文名称 | RFP 标记的 ECV-304 稳转株 |
Lot number | ECV-304-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

ECV-304 细胞:ECV-304 细胞最初被认为是人脐静脉内皮细胞,可用于脐静脉内皮损伤修复的研究。但经检测证明,该细胞已被膀胱癌细胞污染,具有 T24 细胞特性,形态为上皮细胞样,贴壁生长。
构建过程:通常是将携带红色荧光蛋白(RFP)基因和嘌呤霉素(Puro)抗性基因的外源 DNA 克隆到载体上,通过慢病毒感染等方式将载体转染至 ECV - 304 细胞,使外源 DNA 整合到细胞的染色体中。然后利用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了外源 DNA 并表达出嘌呤霉素抗性蛋白的细胞才能存活,经过筛选和单克隆化等步骤,最终获得稳定表达 RFP 的 ECV - 304 - RFP - Puro 稳转株。
RFP 和 Puro 的作用:RFP 作为一种生物标记物,在细胞中表达后,可在蓝光激发下产生明亮的红色荧光。这使得研究人员能够方便地通过荧光显微镜等设备对细胞进行观察、追踪,监测细胞的生理过程、可视化蛋白定位以及检测体内转基因表达等。Puro 是一种抗生素,在稳转株构建过程中,用于筛选成功转染了含有 Puro 抗性基因载体的细胞。只有那些整合了外源 DNA 并表达出 Puro 抗性蛋白的细胞,才能在含有 Puro 的培养基中存活下来,从而实现对稳转细胞的筛选。
应用:这种稳转株可用于多种生物学研究。例如,在细胞生物学研究中,利用 RFP 的荧光特性,可以观察 ECV - 304 细胞在体外培养条件下的生长、迁移、分化等过程;在肿瘤学研究中,由于 ECV - 304 细胞具有膀胱癌细胞特性,可将其用于研究肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移等机制,以及筛选抗肿瘤药物等。同时,稳转株的稳定表达特性也便于长期观察和实验,减少了因细胞转染效率不稳定等因素带来的实验误差。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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