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Kasumi-6-GFP-Puro稳转株
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详细内容
Kasumi-6-GFP-Puro稳转株
英文名称 | Kasumi-6-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1654 |
中文名称 | GFP 标记的 Kasumi-6 稳转株 |
Lot number | Kasumi-6-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成髓细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640培养基,含有调整为含有1.5 g/L碳酸氢钠、4.5 g/L葡萄糖、10 mM HEPES和1.0 mM丙酮酸钠的2 mM L-谷氨酰胺,补充有2 ng/ml人重组粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和20%胎牛血清。 |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

Kasumi-6 细胞
来源:Kasumi-6 细胞是 1999 年从一位 64 岁亚洲男性性急性髓系白血病(AML)M2 型患者的外周血中分离得到的髓母细胞系。
应用:可作为研究非 t (8;21) M2 型髓系白血病细胞和分子生物学的模型,用于阐明突变的 C/EBPα 在白血病发生中的作用,也可用于免疫学和免疫系统疾病研究。
Kasumi-6-GFP-Puro 稳转株
构建
选择载体:通常会选用慢病毒载体,因其几乎能感染所有类型细胞,可将遗传物质整合到宿主细胞基因组中实现长时间稳定表达。
目的基因插入:将绿色荧光蛋白(GFP)基因和嘌呤霉素抗性(Puro)基因构建到慢病毒载体中,生成重组慢病毒载体。
慢病毒包装:把重组慢病毒载体与包装质粒共转染到宿主细胞中,产生具有感染能力的慢病毒颗粒。
细胞感染与筛选:用慢病毒颗粒感染 Kasumi-6 细胞,使病毒整合到细胞基因组中。利用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了外源基因并稳定表达的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,再通过流式细胞术等方法筛选出高表达 GFP 的细胞,从而获得 Kasumi-6-GFP-Puro 稳转株。
特性
荧光标记:表达绿色荧光蛋白,在荧光显微镜下可发出绿色荧光,便于观察细胞的位置、形态和迁移等行为,也可用于评估转染或感染效率。
药物抗性:具有嘌呤霉素抗性,能够在含有嘌呤霉素的培养基中生长,利用这一特性可在细胞培养过程中对稳转株进行筛选和维持,去除未成功转染或丢失外源基因的细胞。
稳定表达:将 GFP 基因和其他相关基因稳定整合到 Kasumi-6 细胞的基因组中,能够持续稳定地表达 GFP 蛋白及其他目的蛋白,可用于长期的实验研究,减少了因基因表达不稳定带来的实验误差。
应用
细胞生物学研究:通过观察 GFP 的荧光信号,追踪 Kasumi-6 细胞在体内外的增殖、分化、凋亡等过程,研究细胞周期调控、细胞信号转导等机制。
药物研发:用于筛选和评估针对急性髓系白血病的潜在药物,观察药物对 Kasumi-6 细胞生长、凋亡、迁移等行为的影响,还可用于研究药物的作用靶点和作用机制。
基因功能研究:可通过在稳转株中过表达或干扰特定基因,结合 GFP 荧光标记和嘌呤霉素抗性筛选,研究这些基因在 Kasumi-6 细胞中的功能,以及它们在白血病发生、发展中的作用。
肿瘤模型构建:将 Kasumi-6-GFP-Puro 稳转株接种到动物体内,建立白血病动物模型,用于研究白血病的体内生长、转移和侵袭等过程,以及评估治疗方案的有效性和安全性。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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