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Kasumi-6-RFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
Kasumi-6-RFP-Puro稳转株
英文名称 | Kasumi-6-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1678 |
中文名称 | RFP 标记的 Kasumi-6 稳转株 |
Lot number | Kasumi-6-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成髓细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640培养基，含有调整为含有1.5 g/L碳酸氢钠、4.5 g/L葡萄糖、10 mM HEPES和1.0 mM丙酮酸钠的2 mM L-谷氨酰胺，补充有2 ng/ml人重组粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和20%胎牛血清。 |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
背景信息
来源：Kasumi-6 细胞来源于 1999 年从一位急性髓系白血病（AML）M2 亚型的 64 岁亚洲男性患者外周血中分离出的成髓细胞。
遗传修饰：通过基因工程技术，将含有红色荧光蛋白（RFP）基因和嘌呤霉素抗性（Puro）基因的外源 DNA 片段导入 Kasumi-6 细胞中，使其稳定整合到细胞基因组中，从而获得 Kasumi-6-RFP-Puro 稳转株。
构建过程
慢病毒表达载体构建：将 RFP 基因和 Puro 基因构建到慢病毒载体中，生成重组慢病毒载体。
慢病毒包装：把重组慢病毒载体与包装质粒共转染到宿主细胞中，产生具有感染能力的慢病毒颗粒，并进行浓缩及滴度测定。
细胞感染与筛选：用浓缩后的慢病毒颗粒感染 Kasumi-6 细胞，使病毒整合到细胞基因组中。然后利用嘌呤霉素进行筛选，只有成功导入外源基因并稳定表达的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活，再通过单克隆培养、扩增与鉴定等步骤，最终获得 Kasumi-6-RFP-Puro 稳转株。
应用领域
细胞追踪：由于稳转株表达红色荧光蛋白，在荧光显微镜下可以发出红色荧光，因此可以方便地对细胞进行实时追踪，观察其在体内外的迁移、分化、增殖等行为。
药物筛选：可以利用该稳转株筛选针对 Kasumi-6 细胞的抗癌药物，通过观察药物作用后细胞的生长、凋亡、荧光强度变化等指标，评估药物的疗效和作用机制。
基因功能研究：通过在稳转株中过表达或干扰特定基因，研究其对 Kasumi-6 细胞生物学特性的影响，如细胞周期、凋亡、侵袭和迁移能力等，从而揭示相关基因在白血病发生发展中的作用。
培养与保存
培养条件：通常使用 RPMI-1640 培养基，添加 20% 胎牛血清、2 ng/ml 人重组粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF），在 37℃、5%CO2 的培养箱中培养。
细胞传代：当细胞密度达到 80%-90% 汇合度时，进行传代培养。传代时，用胰酶消化细胞，然后按照适当的比例接种到新的培养瓶中。
细胞保存：在液氮中保存，可长期维持细胞的活性和稳定性。在保存过程中，需要使用含有 10% DMSO 的冻存液，以保护细胞免受冷冻损伤。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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