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TF-1-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
TF-1-GFP-Puro稳转株
英文名称 | TF-1-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1679 |
中文名称 | GFP 标记的 TF-1 稳转株 |
Lot number | TF-1-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 2 ng/ml重组人GM-CSF + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
TF-1-GFP-Puro 稳转株概述
TF-1 细胞是一种人红白血病细胞系，源自急性髓系白血病（AML）患者的骨髓样本，常用于造血细胞研究、细胞因子反应和信号传导等领域。
**GFP（绿色荧光蛋白）** 作为报告基因，可通过荧光显微镜或流式细胞术直观追踪细胞，监测基因表达或细胞定位。
**Puro（嘌呤霉素）** 是一种抗生素，用于稳转株筛选 —— 通过质粒载体将含 GFP 的目的基因与嘌呤霉素抗性基因共转染细胞，未成功整合目的基因的细胞会被嘌呤霉素杀死，存活细胞即为稳定表达 GFP 的稳转株。
培养与维护要点
培养基
推荐使用RPMI 1640 培养基，添加 10% 胎牛血清（FBS）、1% 双抗（青霉素 / 链霉素），以及2-4 µg/mL 嘌呤霉素（维持抗性）。
注意：初次培养时需通过梯度实验确定最佳嘌呤霉素浓度（通常 2-8 µg/mL），避免浓度过高导致细胞毒性。
培养条件
恒温 37℃，5% CO₂，饱和湿度，悬浮培养时建议定期轻柔吹打细胞，避免聚团。
传代密度：当细胞密度达 1×10⁶–3×10⁶ cells/mL 时，按 1:3–1:5 比例传代，避免密度过高引发凋亡。
荧光检测
定期用流式细胞术（FACS）检测 GFP 阳性率，确保稳转株纯度（通常＞95%）。
荧光显微镜下可见绿色荧光均匀分布于细胞质或细胞核（取决于 GFP 融合蛋白的定位）。
常见应用方向
细胞示踪与体内成像
移植至免疫缺陷小鼠（如 NOD/SCID 小鼠）后，通过活体荧光成像监测肿瘤生长或造血细胞归巢。
药物筛选与毒性评估
利用 GFP 荧光强度变化反映药物对细胞活性的影响（如凋亡诱导剂可导致 GFP⁺细胞比例下降）。
信号通路研究
构建 GFP 融合蛋白（如 GFP - 蛋白激酶），通过荧光共定位分析蛋白互作或亚细胞定位变化。
细胞分选与单克隆化
通过流式细胞分选（FACS）获得单克隆细胞，确保稳转株遗传背景均一。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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