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CFPAC-1-GFP-Puro稳转株
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详细内容
CFPAC-1-GFP-Puro稳转株
英文名称 | CFPAC-1-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1742 |
中文名称 | GFP 标记的 CFPAC-1 稳转株 |
Lot number | CFPAC-1-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | IMDM+10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞来源:CFPAC - 1 细胞是胰腺管腺癌细胞系,来源于 26 岁白人男性囊性纤维变性(CF)的肝转移灶。该细胞系表达囊性纤维变性跨膜调节因子(CFTR),形态为上皮样且顶端微绒毛极化,表达胰腺管细胞特征性的细胞角蛋白和癌胚抗原,倍增时间为 30 - 32 小时,是亚 3 倍体的细胞系,36%的细胞的染色体模式数为 75,传代至 24 代时在无胸腺小鼠中致瘤。
构建原理:将含有绿色荧光蛋白(GFP)基因和嘌呤霉素抗性(Puro)基因的目的基因序列装载至重组载体中,再通过慢病毒系统或转座子系统将目的序列整合至 CFPAC - 1 细胞的染色体中。这样,目的基因就能在细胞中持续、稳定地表达,同时细胞获得了对嘌呤霉素的抗性,便于后续的筛选。
标记与筛选:
GFP 标记:GFP 是一种能在蓝光或紫外光激发下发出绿色荧光的蛋白质。在 CFPAC - 1 - GFP - Puro 稳转株中,GFP 基因与目的基因一起稳定表达,使得细胞能够发出绿色荧光。通过荧光显微镜等设备,可以方便地观察到表达 GFP 的细胞,从而对细胞进行定位、追踪以及分选等操作。例如,在研究细胞的迁移、分化等过程中,可利用 GFP 的荧光特性直观地观察细胞的动态变化。
Puro 筛选:Puro 是一种抗生素,含有 Puro 抗性基因的细胞能够在含有嘌呤霉素的培养基中存活,而不含该抗性基因的细胞则会被杀死。在构建稳转株的过程中,使用含有嘌呤霉素的培养基进行筛选,只有成功整合了目的基因(包括 Puro 抗性基因)的 CFPAC - 1 细胞才能生长和增殖,从而得到稳定表达目的基因的细胞株,即 CFPAC - 1 - GFP - Puro 稳转株。
应用:
基因功能研究:通过观察 CFPAC - 1 细胞在稳定表达 GFP 以及可能的其他目的基因后的生物学行为变化,如细胞增殖、凋亡、侵袭能力等,来研究相关基因在胰腺癌发生、发展等过程中的功能。
药物研发与筛选:可以利用该稳转株来筛选对胰腺癌细胞具有抑制作用的药物。例如,将不同的药物作用于 CFPAC - 1 - GFP - Puro 稳转株,通过观察细胞的生长、形态变化以及 GFP 的表达情况等,评估药物的疗效和作用机制。
细胞示踪:由于细胞表达 GFP,在将其移植到动物模型或其他实验环境中后,可以通过荧光成像等技术对细胞进行实时追踪,了解细胞在体内的分布、迁移和归巢等情况,为研究胰腺癌的转移机制以及细胞治疗等提供重要的实验依据。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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