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HT-3-GFP-Puro稳转株
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详细内容
HT-3-GFP-Puro稳转株
英文名称 | HT-3-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1823 |
中文名称 | GFP 标记的 HT-3 稳转株 |
Lot number | HT-3-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | McCoy's 5a + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

HT-3-GFP-Puro 稳转株概述
HT-3 细胞是一种源自人类膀胱癌细胞的细胞系,具有恶性增殖特性,常用于癌症生物学、药物筛选等研究。**GFP(绿色荧光蛋白)** 作为报告基因,可通过荧光显微镜直观观察细胞表达情况;**Puro(嘌呤霉素)** 是一种抗生素,用于筛选成功转染的细胞(稳转株)。因此,HT-3-GFP-Puro 稳转株是指通过基因工程技术,将携带 GFP 基因并赋予嘌呤霉素抗性的质粒稳定转染至 HT-3 细胞中,获得的可稳定表达 GFP 且能在嘌呤霉素培养基中存活的细胞株。
关键特性与应用
1. 特性
荧光标记:GFP 表达使细胞在蓝光激发下发出绿色荧光,便于通过荧光成像追踪细胞位置、迁移或形态变化,或与其他荧光分子(如 RFP、mCherry)联合用于多色标记实验。
抗生素筛选:Puro 抗性基因使未成功转染的细胞在含嘌呤霉素的培养基中被清除,确保稳转株的纯度和稳定性。
遗传稳定性:外源基因整合至细胞基因组中,可在传代过程中持续表达,适合长期实验(如细胞功能研究、动物模型构建)。
2. 应用场景
细胞示踪与成像:
在肿瘤转移研究中,通过 GFP 荧光观察 HT-3 细胞在体内(如小鼠模型)的扩散路径。
结合活细胞成像技术,实时监测细胞增殖、凋亡或药物处理后的动态变化。
基因功能研究:
将 GFP 与目标基因(如癌基因、抑癌基因)融合表达,通过荧光共定位分析目标蛋白的亚细胞分布。
利用稳转株构建敲低 / 过表达模型,结合嘌呤霉素筛选获得纯合细胞群,用于功能丧失 / 获得实验(如增殖能力、侵袭性检测)。
药物筛选与毒性评估:
通过 GFP 荧光强度或细胞存活率(如 MTT、CCK-8 法)量化药物对 HT-3 细胞的抑制效果,筛选潜在抗癌化合物。
在嘌呤霉素压力下评估药物对稳转株的选择性毒性,排除非特异性杀伤作用。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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