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CX-1-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
CX-1-GFP-Puro稳转株
英文名称 | CX-1-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1885 |
中文名称 | GFP 标记的 CX-1 稳转株 |
Lot number | CX-1-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
一、基本概念
名称解析
CX-1：通常指细胞株的原始名称，可能来源于某种肿瘤细胞（如人结肠癌细胞）或特定组织来源的细胞系。
GFP：绿色荧光蛋白（Green Fluorescent Protein），作为报告基因，用于可视化追踪细胞内的基因表达或蛋白定位，可通过荧光显微镜直接观察。
Puro：嘌呤霉素（Puromycin），是一种抗生素，用于稳转株的筛选和维持。携带 Puro 抗性基因的细胞可在含嘌呤霉素的培养基中存活，未成功转染的细胞则被淘汰。
核心特点
稳定表达：外源基因（如 GFP）通过载体整合到细胞基因组中，可在传代过程中稳定遗传。
可筛选性：利用嘌呤霉素抗性筛选，确保只有成功整合目的基因的细胞存活。
可视化标记：GFP 的荧光特性便于实时观察细胞状态、迁移或特定蛋白的定位。
二、构建流程
载体构建
构建包含 GFP 基因和 Puro 抗性基因的表达载体（如质粒），通常通过限制性内切酶酶切和 DNA 连接酶连接实现。
细胞转染
将载体导入目标细胞（如 CX-1 细胞），常用方法包括脂质体转染、电穿孔或病毒介导的转染（如慢病毒、逆转录病毒）。
筛选与鉴定
嘌呤霉素筛选：转染后培养细胞，加入嘌呤霉素，未成功整合载体的细胞死亡，存活细胞形成单克隆。
荧光检测：通过荧光显微镜或流式细胞术（FACS）验证 GFP 的表达水平，确保稳转株的均一性。
单克隆化
通过有限稀释法或克隆环法挑选单克隆细胞，扩大培养后建立稳定株系。
三、应用场景
细胞成像与追踪
利用 GFP 的荧光特性，观察细胞在体内外的迁移、增殖或与其他细胞的相互作用（如肿瘤细胞侵袭实验）。
药物筛选与毒性分析
在含嘌呤霉素的培养基中进行药物处理，通过荧光强度或细胞存活率评估药物对稳转株的影响，筛选抗肿瘤药物或研究耐药机制。
基因功能研究
作为模型研究 GFP 标记的融合蛋白功能，或通过敲减 / 过表达其他基因，结合 GFP 信号分析基因互作网络。
体内研究（如动物模型）
将稳转株注射到动物体内（如裸鼠），通过活体成像技术监测肿瘤生长、转移或治疗效果。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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