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详细内容
WILL-2-RFP-Puro稳转株
英文名称 | WILL-2-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2052 |
中文名称 | RFP 标记的 WILL-2 稳转株 |
Lot number | WILL-2-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 20%FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

构建原理:通常是将包含 RFP 基因以及 Puro 抗性基因的外源 DNA 片段,克隆到特定的载体上。然后通过脂质体转染、病毒转染等方式将载体导入 WILL-2 细胞(可能是某种特定的细胞系)中,使外源 DNA 整合到细胞的染色体上。在含有嘌呤霉素的培养基中进行筛选,只有成功整合了外源 DNA 并表达 Puro 抗性蛋白的细胞才能存活,这些细胞会持续稳定地表达 RFP。
应用领域:
细胞示踪:RFP 作为一种荧光标记,可使细胞在荧光显微镜下发出红色荧光,便于在体外或体内对 WILL-2 细胞进行追踪和观察,了解细胞的迁移、分化等行为。例如,在研究细胞在组织中的分布和动态变化时,标记后的细胞能在复杂的生物环境中被清晰识别。
基因表达研究:可作为报告基因,用于监测特定基因的表达情况。如果将 RFP 基因与目的基因构建在同一表达载体上,通过观察 RFP 的表达,就能间接了解目的基因的表达水平、表达部位等信息。
药物筛选和细胞模型建立:利用其 Puro 抗性,可在药物研发中快速筛选出对细胞生长有影响的化合物或生物制剂。同时,稳定表达 RFP 的特性也有助于建立特定的疾病细胞模型,用于研究疾病的发生、发展机制以及药物疗效评估等。
培养与维护:培养 WILL-2-RFP-Puro 稳转株时,需要使用适合 WILL-2 细胞生长的培养基,并添加适量的嘌呤霉素,以维持对稳转株的筛选压力,确保细胞持续表达 RFP 和 Puro 抗性。此外,还需注意培养条件,如温度、湿度、二氧化碳浓度等,以保证细胞的正常生长和稳定表达外源基因。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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