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B-3-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
B-3-GFP-Puro稳转株
英文名称 | B-3-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2013 |
中文名称 | GFP 标记的 B-3 稳转株 |
Lot number | B-3-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | EMEM + 20％ FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
B-3-GFP-Puro 稳转株概述
B-3-GFP-Puro 稳转株是一种通过基因工程技术构建的细胞模型，常用于生物学研究，尤其是基因表达、细胞成像和药物筛选等领域。以下从名称解析、构建原理、应用场景及操作注意事项等方面展开说明：
一、名称解析
B-3
通常代表细胞株的来源或类型，可能是某种特定细胞系（如肿瘤细胞、永生化细胞等）的编号或简称，需结合具体研究背景确定（例如某些实验室自定义的命名规则）。
GFP
绿色荧光蛋白（Green Fluorescent Protein）的缩写，作为报告基因，其表达产物可在荧光显微镜下发出绿色荧光，用于实时追踪细胞内基因表达、蛋白定位或细胞迁移等过程。
Puro
嘌呤霉素（Puromycin）的缩写，是一种抗生素，用于稳转株筛选。携带 Puro 抗性基因的细胞可在含嘌呤霉素的培养基中存活，未成功整合目的基因的细胞则被淘汰。
二、构建原理与流程
核心技术
通过病毒载体（如慢病毒、逆转录病毒）或质粒转染，将包含 GFP 基因 和 Puro 抗性基因 的表达载体导入目标细胞（如 B-3 细胞）。
利用嘌呤霉素筛选，获得稳定整合外源基因的细胞克隆，即 “稳转株”。
关键步骤
载体构建：构建含 GFP 编码序列、Puro 抗性基因及目的基因（若有）的重组载体。
转染 / 感染：通过脂质体转染或病毒感染将载体导入细胞。
筛选与鉴定：使用嘌呤霉素杀死未成功转染的细胞，存活细胞通过有限稀释法或流式细胞术筛选单克隆，经荧光检测和分子生物学验证（如 PCR、Western blot）确认 GFP 稳定表达。
三、应用场景
细胞成像与追踪
利用 GFP 荧光信号，实时观察细胞形态、分裂、凋亡或在体内的分布（如动物模型中的移植研究）。
药物筛选与毒性分析
Puro 抗性基因作为筛选标记，可用于构建稳定表达靶标蛋白的细胞模型，评估药物对细胞功能的影响（如增殖、凋亡）。
基因功能研究
结合 CRISPR-Cas9 等基因编辑技术，构建敲除 / 过表达特定基因的稳转株，通过 GFP 标记追踪基因编辑效率或细胞表型变化。
蛋白互作与定位研究
将 GFP 与目的蛋白融合表达，通过荧光共定位或免疫共沉淀分析蛋白间相互作用及亚细胞定位。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：B-3-GFP-Puro稳转株,GFP,标记的,B-3,稳转株,B-3-GFP-Puro,polyclonal,stable,cell,line
