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RC-K8-GFP-Puro稳转株
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详细内容
RC-K8-GFP-Puro稳转株
英文名称 | RC-K8-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2053 |
中文名称 | GFP 标记的 RC-K8 稳转株 |
Lot number | RC-K8-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | B细胞淋巴瘤 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

名称含义:“RC - K8” 可能代表特定的基因、细胞类型或某种特定的序列元件,是该稳转株所针对的目标基因或相关标识。“GFP” 即绿色荧光蛋白,是一种常用的报告基因,它能够在细胞中表达并发出绿色荧光,便于通过荧光显微镜等手段对细胞进行观察和追踪,了解细胞的位置、形态以及目标基因的表达情况等。“Puro” 指嘌呤霉素,是一种抗生素,在这里表示该稳转株的构建载体中含有嘌呤霉素抗性基因。在构建稳转株的过程中,利用嘌呤霉素对细胞进行筛选,只有成功整合了外源基因(包含目标基因 RC - K8 和 GFP 等)且表达出嘌呤霉素抗性蛋白的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活并稳定传代,从而得到稳定表达目标基因的细胞株,即 RC - K8 - GFP - Puro 稳转株。
构建方法:通常先将包含 RC - K8 基因、GFP 基因以及嘌呤霉素抗性基因的外源 DNA 克隆到合适的载体上,然后通过慢病毒感染或脂质体转染等方法将重组载体导入宿主细胞。病毒感染法效率较高,宿主范围广。以慢病毒感染为例,首先要确定目标细胞系的相关信息,进行预实验确定慢病毒感染复数(MOI)值和筛选药物嘌呤霉素的用量。接着将细胞铺板,按照计算好的病毒体积进行细胞感染,感染后第二天换液,转染 48 小时后用嘌呤霉素进行筛选,最终得到稳定表达的细胞株。
应用领域:在科研中,可用于研究 RC - K8 基因的功能,通过 GFP 的荧光信号追踪该基因在细胞内的表达和定位情况,为相关疾病机制研究、药物研发等提供细胞模型。例如,若 RC - K8 基因与某种疾病相关,利用该稳转株可以观察基因表达变化对细胞生理功能、信号通路等方面的影响,也可用于筛选能够调节 RC - K8 基因表达或功能的药物化合物。在细胞生物学研究中,还可借助 GFP 的荧光特性,对细胞的生长、分化、迁移等过程进行实时观察和分析。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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