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OCI-LY3-GFP-Puro稳转株
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详细内容
OCI-LY3-GFP-Puro稳转株
英文名称 | OCI-LY3-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2039 |
中文名称 | GFP 标记的 OCI-LY3 稳转株 |
Lot number | OCI-LY3-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | B细胞淋巴瘤细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 20%FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

OCI-LY3-GFP-Puro 稳转株概述
OCI-LY3 细胞系来源于人类弥漫性大 B 细胞淋巴瘤(DLBCL),是研究 B 细胞恶性肿瘤、淋巴瘤发病机制及药物筛选的常用模型。
**GFP(绿色荧光蛋白)** 作为报告基因,可通过荧光显微镜或流式细胞术直观追踪细胞,监测细胞增殖、迁移或基因表达情况。
**Puro(嘌呤霉素)** 是一种抗生素,用于稳转株筛选 —— 通过质粒转染将携带 GFP 基因和嘌呤霉素抗性基因的载体导入细胞,未成功整合载体的细胞会被嘌呤霉素杀死,存活细胞即为稳定表达 GFP 的稳转株。
主要应用场景
细胞示踪与成像研究
利用 GFP 荧光信号,在活体或体外实时观察细胞分布、迁移路径及相互作用(如肿瘤细胞与免疫细胞的动态互作)。
示例:通过荧光显微镜拍摄 OCI-LY3-GFP-Puro 细胞在三维基质中的侵袭过程,分析淋巴瘤细胞的转移能力。
药物筛选与疗效评估
稳转株可用于高通量筛选靶向 DLBCL 的药物,通过荧光强度变化反映细胞活性(如药物诱导的细胞凋亡会导致 GFP 信号减弱)。
结合流式细胞术,快速定量分析药物对细胞周期、凋亡率的影响。
基因功能研究
作为载体工具,可进一步转染其他目的基因(如致癌基因或抑癌基因),通过 GFP 标记追踪基因编辑细胞的克隆形成或功能表型。
构建流程与关键技术
载体构建
构建含 GFP 基因和嘌呤霉素抗性基因(如 puroR)的表达载体(如慢病毒质粒或逆转录病毒质粒),确保 GFP 与抗性基因共表达。
细胞转染
通过病毒感染(慢病毒 / 逆转录病毒)或化学转染(如脂质体)将载体导入 OCI-LY3 细胞。病毒感染效率更高,适用于难转染的细胞系。
嘌呤霉素筛选
转染后 48⁻⁷2 小时,加入嘌呤霉素(浓度需预实验优化,通常为 1-5 µg/mL),持续培养 5⁻⁷ 天,杀死未整合质粒的细胞。
存活细胞通过有限稀释法或流式细胞分选(FACS)获得单克隆稳转株,确保 GFP 表达均一性。
鉴定与验证
荧光显微镜:观察 GFP 阳性率(应接近 100%)。
流式细胞术:检测 GFP 荧光强度的均质性,排除非特异性表达细胞。
Western blot:验证 GFP 蛋白的稳定表达。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:OCI-LY3-GFP-Puro稳转株,GFP,标记的,OCI-LY3,稳转株,OCI-LY3-GFP-Puro,polyclonal,stable,cell,line















