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HCT116-RFP-Puro+ffluc单克隆株
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详细内容
HCT116-RFP-Puro+ffluc单克隆株
产品名称 | HCT116-ffluc2-RFP-Puro 单克隆细胞株 |
产品货号 | XY-H2176 |
中文名称 | ffluc2 和 RFP 双标的 HCT116 单克隆细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转细胞株; (4)采用无限稀释法筛选单克隆细胞株; (5)单克隆细胞株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |

构建方式:通常是通过慢病毒转染等方式,将含有红色荧光蛋白(RFP)基因、嘌呤霉素抗性(Puro)基因以及萤火虫荧光素酶(ffluc)基因的表达载体导入 HCT116 细胞中。经过嘌呤霉素筛选,获得稳定表达 RFP 和 ffluc 的细胞群体,再通过单克隆化技术,得到 HCT116 - RFP - Puro + ffluc 单克隆株。例如,可能像文献中提到的将相关基因通过慢病毒载体转导到 HCT116 细胞中,利用嘌呤霉素进行筛选,从而获得稳定表达的细胞株。
应用领域:
肿瘤学研究:HCT116 细胞是一种人结肠癌细胞系,常用于肿瘤学研究。该单克隆株可用于研究肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移等生物学行为。由于表达 RFP 和 ffluc,可通过荧光成像和生物发光成像技术,在体外和体内实时监测肿瘤细胞的生长、分布和转移情况。例如,将细胞接种到动物模型中,通过成像观察肿瘤的形成和发展过程,以及研究肿瘤细胞在不同组织中的转移情况。
药物研发:可用于筛选抗肿瘤药物,评估药物对肿瘤细胞的抑制作用和疗效。通过观察药物处理后细胞的荧光信号变化,了解药物对肿瘤细胞生长、代谢的影响,为药物研发提供实验依据。比如,在药物筛选实验中,将不同的药物作用于该细胞株,通过检测荧光信号来判断药物是否对肿瘤细胞有抑制作用,从而筛选出有效的抗肿瘤药物。
基因功能研究:作为一种工具细胞,可用于研究与肿瘤发生、发展相关基因的功能。通过对细胞进行基因编辑或转染其他基因,结合 RFP 和 ffluc 的标记,分析基因表达变化对细胞生物学行为的影响。例如,敲除或过表达某些基因后,观察细胞的荧光变化以及生长、迁移等能力的改变,从而研究这些基因在肿瘤细胞中的功能。
培养条件:一般使用含 10% 胎牛血清(FBS)、1× 青霉素 / 链霉素的 DMEM 培养基,同时根据需要添加适量的嘌呤霉素,以维持细胞对嘌呤霉素的抗性和目的基因的稳定表达。具体的培养条件可能因实验室和实验要求的不同而有所差异,但通常都需要在无菌、适宜的温度(如 37℃)和二氧化碳浓度(如 5%)的培养箱中进行培养。
注意事项:在使用该细胞株进行实验时,需要注意其生物安全等级。由于涉及到基因编辑和可能的肿瘤细胞特性,通常需要在生物安全二级(BSL - 2)实验室条件下进行操作,并由经过专业培训的人员进行。此外,还需要注意细胞的传代次数和培养条件的稳定性,以确保细胞的特性和实验结果的可靠性。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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