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Huh7-GFP-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
Huh7-GFP-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | Huh7-GFP-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2181 |
中文名称 | ffluc 和 GFP 双标的 Huh7 稳转株 |
Lot number | Huh7-24A6P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

Huh7-GFP-Puro+ffluc 稳转株概述
Huh7 细胞是一种人肝癌细胞系,常用于肝脏疾病、肿瘤研究及药物筛选。稳转株(稳定转染细胞株)是通过基因工程技术将外源基因稳定整合到细胞基因组中,使其能长期表达特定蛋白或标记物的细胞群体。
关键组件及功能
GFP(绿色荧光蛋白)
功能:作为报告基因,通过荧光显微镜可直接观察细胞形态及转染效率,便于筛选和追踪阳性细胞。
应用场景:细胞示踪、亚细胞定位研究或荧光激活细胞分选(FACS)。
Puro(嘌呤霉素)
功能:抗性基因,赋予细胞对嘌呤霉素的耐药性,用于稳转株的筛选和维持(未成功整合外源基因的细胞会被嘌呤霉素杀死)。
ffluc(萤火虫荧光素酶)
功能:酶报告基因,催化荧光素底物发光,通过 luciferase 检测系统可定量分析基因表达水平或细胞活性。
应用场景:体内成像(如活体动物肿瘤模型)、药物代谢研究或信号通路分析。
构建流程
载体构建:将 GFP、Puro 抗性基因和 ffluc 基因插入到合适的载体(如慢病毒载体)中,形成重组质粒。
细胞转染:通过慢病毒感染或脂质体转染等方法将重组载体导入 Huh7 细胞。
筛选与扩增:用嘌呤霉素处理细胞,筛选出稳定整合外源基因的单克隆细胞,扩大培养后获得稳转株。
鉴定验证:通过荧光显微镜观察 GFP 表达、luciferase 活性检测 ffluc 功能,确保基因稳定表达。
应用领域
肿瘤研究
利用 ffluc 进行活体成像,追踪肿瘤细胞在动物体内的生长、转移及药物响应。
GFP 标记用于观察肿瘤细胞与微环境的相互作用。
药物开发
高通量筛选抗肿瘤药物,通过 ffluc 活性变化评估药物对细胞增殖或凋亡的影响。
研究药物代谢动力学,分析药物在肝脏中的分布和代谢途径。
基因功能研究
结合 GFP 荧光标记,研究目的基因在细胞中的定位或动态变化。
通过 ffluc 定量分析基因调控网络或信号通路的活性。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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