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HepG2-RFP-Puro+ffluc单克隆株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
HepG2-RFP-Puro+ffluc单克隆株
英文名称 | HepG2-RFP-Puro+ffluc monoclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2186 |
中文名称 | ffluc 和 RFP 双标的 HepG2 单克隆株 |
Lot number | HepG2-24A7-C2/S |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）采用无限稀释法筛选单克隆株； （5）单克隆株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液（VGA-0046-0100） |
存储条件 | 液氮 |
HepG2-RFP-Puro+ffluc 单克隆株概述
HepG2-RFP-Puro+ffluc 单克隆株是基于人肝癌细胞系 HepG2 构建的基因工程细胞株，通过稳定转染技术导入了多种报告基因和筛选标记，常用于肿瘤研究、药物筛选、体内成像等领域。以下从细胞特性、构建方法、应用场景和注意事项四方面详细说明：
一、细胞特性
1. 标记基因与功能
标记基因 类型 功能描述
RFP 红色荧光蛋白 用于细胞可视化追踪，在荧光显微镜下可发出红色荧光，便于观察细胞形态和分布。
Puro 嘌呤霉素抗性基因 作为筛选标记，转染成功的细胞可在含嘌呤霉素的培养基中存活，用于单克隆株的筛选。
ffluc 萤火虫荧光素酶 可催化荧光素产生生物发光，通过活体成像技术（如小动物成像系统）检测体内肿瘤生长、转移等。
2. 细胞来源与背景
亲本细胞：HepG2 是人肝癌细胞系，来源于一名 15 岁白人男性的肝组织，具有贴壁生长特性，常用于肝癌机制研究。
单克隆株：通过有限稀释法或流式细胞术筛选单个转染成功的细胞，扩增后获得遗传背景均一的细胞群体，确保标记基因稳定表达。
二、构建方法
1. 载体设计
构建包含RFP-ffluc 融合表达盒和Puro 抗性基因的质粒载体（如慢病毒载体或质粒载体），通常由启动子（如 CMV）驱动基因表达。
2. 转染与筛选
转染：通过脂质体转染、电穿孔或慢病毒感染将载体导入 HepG2 细胞。
筛选：使用嘌呤霉素（Puro）处理细胞，未成功转染的细胞死亡，存活细胞形成单克隆。
鉴定：通过荧光显微镜观察 RFP 表达、 luciferase 活性检测（荧光素酶报告基因检测试剂盒）验证标记基因功能。
三、应用场景
1. 体外研究
细胞追踪与形态学分析：利用 RFP 荧光标记观察细胞迁移、侵袭或共培养中的行为。
药物敏感性检测：通过 ffluc 活性反映细胞增殖或凋亡，筛选抗肿瘤药物（如荧光素酶活性与细胞数量呈正相关）。
2. 体内研究（动物模型）
肿瘤成瘤与转移模型：将细胞接种至裸鼠等免疫缺陷动物体内，通过活体生物发光成像实时监测肿瘤生长体积、转移灶位置及药物治疗效果。
基因表达调控研究：结合启动子 - ffluc 报告系统，分析特定基因在体内的表达调控机制。
3. 单克隆验证
由于单克隆株遗传均一性高，可排除多克隆细胞中标记基因表达异质性对实验结果的干扰，适用于需要高稳定性的长期实验（如体内成瘤率统计）。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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